Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-PMS2 (Validato KO) per WB ed ELISA - P54278

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PMS2

• PMS2 (omologo 2 della proteina PMS1), anche denominato MLH4, PMS-2, PMSL2, HNPCC4, LYNCH4 o MMRCS4, è un'endonucleasi di riparazione dei mismatch di 96 kDa essenziale per il mantenimento della stabilità genomica.
• È un componente chiave del sistema di riparazione del mismatch del DNA post-replicativo (MMR), formando un eterodimero con MLH1 (MutL alfa). Questo complesso viene reclutato nei siti di mismatch da MutS alfa (MSH2-MSH6) o MutS beta (MSH2-MSH3) dopo il riconoscimento di mismatch base-base o loop di inserzione/cancellazione. Riferimenti correlati: PMID:30653781, PMID:35189042
• Dopo il reclutamento, l'attività endonucleasica di PMS2 introduce rotture a filamento singolo vicino al mismatch, creando punti di ingresso per l'esonucleasi EXO1 per degradare il filamento contenente l'errore. La metilazione del DNA probabilmente dirige la scissione verso il filamento neo-sintetizzato, garantendo una riparazione specifica per il filamento.
• PMS2 possiede anche attività ATPasica; tuttavia, l'idrolisi dell'ATP potrebbe non essere richiesta per una riparazione dei mismatch competente, poiché sono assenti grandi cambiamenti conformazionali.
• Oltre alla riparazione dei mismatch, PMS2 è implicato nella segnalazione dei danni al DNA, promuovendo l'arresto del ciclo cellulare e l'apoptosi in risposta a gravi lesioni del DNA.
• La proteina si localizza prevalentemente nel nucleo, coerentemente con le sue funzioni di riparazione del DNA, e subisce splicing alternativo, portando a multiple isoforme.
• Le mutazioni in PMS2 sono collegate al cancro del colon-retto ereditario non poliposico (HNPCC, sindrome di Lynch) e ad altre sindromi da cancro da difetto di riparazione dei mismatch, classificandolo come un soppressore tumorale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, la proteina bersaglio migra a circa 96 kDa; si consiglia di utilizzare lisati freschi da linee cellulari colo-rettali umane (es. HCT116, SW480) come controlli positivi e di convalidare modelli knockout/knockdown per confermare la specificità della banda.
• Per le applicazioni ELISA, si raccomanda l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della concentrazione dell'anticorpo; testare con la proteina ricombinante umana PMS2 per valutare la sensibilità e la linearità.
• Poiché l'anticorpo è prodotto contro la proteina ricombinante umana PMS2, non è prevista reattività crociata con altre specie; se si tenta con altre specie, eseguire l'allineamento delle sequenze e la convalida.

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