Anticorpo policlonale coniglio anti-PNKD per WB, IF/ICC, ELISA - Q8N490

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PNKD

• PNKD (discinesia parossistica non chinesigenica) è un probabile enzima tioesterasi, noto anche come regolatore della miofibrillogenesi 1 (MR-1) o trans-attivato dalla proteina core 2 del virus dell'epatite C. Esistono due principali isoforme: l'isoforma 1 è specifica del cervello, mentre l'isoforma 2 è espressa ubiquitariamente con i livelli più alti nello scheletro muscolare e nelle miofibrille miocardiche.
• Si ritiene che svolga un ruolo nella disintossicazione cellulare agendo su substrati α-idrossitioesteri ancora sconosciuti. In vitro, mostra un'attività idrolasi molto bassa verso la S-D-lattoil-glutathione, sebbene ciò non sia considerato fisiologicamente rilevante. Riferimenti correlati: PMID:21487022
• La proteina localizza in più compartimenti subcellulari inclusa la membrana cellulare, i mitocondri, il citoplasma, l'apparato di Golgi e il reticolo endoplasmatico.
• PNKD appartiene a una famiglia di metallo-idrolasi e contiene un dominio di legame allo zinco, coerente con la sua classificazione come idrolasi (parole chiave UniProt: Idrolasi, Legame metallico, Zinco).
• Le mutazioni nel gene PNKD sono associate alla discinesia parossistica non chinesigenica (PNKD), un disturbo del movimento caratterizzato da distonia episodica (parole chiave UniProt: Variante di malattia, Distonia).
• La proteina è anche implicata nella miofibrillogenesi ed è un bersaglio trans-attivato della proteina core del virus dell'epatite C, suggerendo ruoli nella biologia muscolare e nella patogenesi virale.
• La sua massa molecolare è di circa 42,9 kDa in base alla previsione della sequenza; l'immunogeno per questo anticorpo corrisponde agli aminoacidi N-terminali 1-270 dell'isoforma 1 di PNKD umana.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-270) di PNKD umana, che è conservata nell'isoforma 1. Per la cross-reattività con il topo, verificare l'allineamento della sequenza tra ortologhi PNKD umano e murino.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di ~43 kDa (la banda osservata potrebbe differire a causa dell'isoforma o delle modifiche post-traduzionali). Utilizzare appropriati lisati di controllo positivo da tessuti cerebrali o muscolari scheletrici umani.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), considerare la localizzazione multi-compartimentale della PNKD (membrana cellulare, mitocondri, citoplasma). Si consiglia la colorazione concomitante con marcatori di organelli per confermare la specificità.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per ELISA e può essere utilizzato come reagente di cattura o rilevamento; tuttavia, è richiesta la titolazione e l'ottimizzazione per ogni formato di saggio.
• Data la bassa abbondanza o l'espressione tessuto-specifica dell'isoforma 1, scegliere attentamente i tipi di campioni (es. tessuti cerebrali per l'isoforma 1, tessuti muscolari per l'isoforma 2).

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