Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PNKP per WB, ELISA - Q96T60

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PNKP

• PNKP (fosfatasi/chinasi bifunzionale dei polinucleotidi) svolge un ruolo cruciale nella riparazione dei danni al DNA partecipando alle vie di giunzione delle estremità non omologhe (NHEJ) e di riparazione per escissione di basi (BER). Le sue attività duali di 5'-chinasi e 3'-fosfatasi assicurano che le estremità del DNA siano compatibili con la ligazione. Riferimenti correlati: PMID:10446192, PMID:10446193, PMID:15385968
• È nota anche come 5'-chinasi/3'-fosfatasi del DNA o polinucleotide chinasi-3'-fosfatasi.
• La proteina è localizzata nel nucleo e nei cromosomi (UniProt: LOCALIZZAZIONE SUBCELLULARE).
• L'espressione è tessuto-specifica, con livelli massimi nella milza e nei testicoli e livelli inferiori nell'intestino tenue, nel cervello, nei polmoni e nel fegato. Riferimenti correlati: PMID:10446192, PMID:10446193
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di 57.076 Da, coerente con il rilevamento mediante immunoblotting a circa 57 kDa.
• Le mutazioni cliniche sono associate a malattie quali microcefalia, convulsioni (MCSZ) e atassia-aprassia oculomotoria di tipo 4 (AOA4), sottolineandone l'importanza neurologica.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, mentre lo splicing alternativo produce molteplici isoforme.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione C-terminale (amminoacidi 400–500); verificare che l'epitopo bersaglio sia presente nel proprio sistema sperimentale, soprattutto quando si utilizzano costrutti troncati.
• Per il Western blotting, si prevede una banda a circa 57 kDa. Utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e validare con controlli positivi provenienti da linee cellulari umane, murine o di ratto.
• Per le applicazioni ELISA, valutare l'anticorpo sia come reagente di cattura sia come reagente di rilevamento e ottimizzare le concentrazioni dell'anticorpo di rivestimento e di rilevamento.
• Sebbene sia riportata una reattività crociata con topo e ratto, si raccomanda la validazione di ciascun campione per confermare la reattività e la specificità del segnale.
• In quanto anticorpo monoclonale di coniglio, offre elevata specificità e coerenza tra i lotti; tuttavia, eseguire sempre una validazione iniziale per i test quantitativi critici.

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