Anticorpo policlonale di coniglio anti-PNKP per WB - Q96T60

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della PNKP

• La PNKP è un enzima bifunzionale che agisce sia come DNA 3'-fosfatasi che come 5'-chinasi, essenziale per la riparazione delle rotture del filamento di DNA. Riferimenti correlati: PMID:10446192, PMID:10446193
• Funziona in due principali vie di riparazione del DNA: giunzione delle estremità non omologhe (NHEJ) e riparazione per escissione di basi (BER), elaborando le estremità del DNA danneggiate per la ligazione. Riferimenti correlati: PMID:10446192, PMID:10446193, PMID:15385968
• La PNKP è localizzata nel nucleo e si associa ai cromosomi, coerentemente con il suo ruolo nella riparazione del DNA.
• La proteina è espressa in molti tessuti, con l'espressione più alta nella milza e nei testicoli, e la più bassa nell'intestino tenue; si trova anche a livelli più elevati nel pancreas, nel cuore e nei reni. Riferimenti correlati: PMID:10446192, PMID:10446193
• La PNKP appartiene alla famiglia degli enzimi di riparazione del DNA ed è anche nota come DNA 5'-chinasi/3'-fosfatasi o polinucleotide chinasi-3'-fosfatasi.
• Contiene domini funzionali chiave per il legame dell'ATP e l'attività catalitica, e subisce modifiche post-traduzionali regolatorie, tra cui acetilazione e fosforilazione.
• Le mutazioni nella PNKP sono associate a disturbi neurologici come l'atassia-aprassia oculomotoria 4 (AOA4), la microcefalia con convulsioni (MCSZ) e la malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 2B2 (CMT2B2), evidenziando il suo ruolo critico nella riparazione del DNA neuronale.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 60-320 della PNKP umana (NP_009185.2), coprendo la regione catalitica centrale; questa sequenza è altamente conservata tra uomo, topo e ratto, coerentemente con la reattività crociata riportata.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno ai 57 kDa. Utilizzare una percentuale di gel e un protocollo di trasferimento su membrana appropriati per risolvere questa proteina.
• La PNKP è una proteina nucleare; nell'immunofluorescenza (IF/ICC) o nell'immunoistochimica (IHC-P), aspettarsi una colorazione nucleare. Includere controlli appropriati e passaggi di recupero dell'antigene per ottenere i migliori risultati.
• Confermare i livelli di espressione nel proprio sistema di campioni, poiché la PNKP è espressa in modo ampio ma con variazioni specifiche per tessuto (alta nella milza/testicoli, bassa nell'intestino).

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