Anticorpo Policlonale Anti-POLR1B per WB, ELISA - Q9H9Y6

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di POLR1B

• POLR1B (noto anche come RPA135, RPA2) è la seconda subunità più grande della RNA polimerasi I diretta dal DNA (Pol I), essenziale per la sintesi dei precursori dell'RNA ribosomiale.
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• Forma il centro attivo della Pol I insieme alla subunità più grande POLR1A, coordinando due ioni magnesio catalitici e fornendo residui di lisina che facilitano l'accoppiamento delle basi di Watson-Crick durante l'aggiunta di nucleotidi.
  Riferimenti correlati: PMID:11250903, PMID:11283244, PMID:16809778

• L'enzima trascrive il pre-rRNA 47S dai cluster di geni rRNA multicopia, che viene successivamente processato negli RNA ribosomiali 5.8S, 18S e 28S.
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• POLR1B possiede attività di proofreading; la polimerasi può fermarsi e retrocedere, permettendo la scissione dei nucleotidi incorporati erroneamente tramite la subunità POLR1H.
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• Si localizza nel nucleolo e nei cromosomi ed è altamente processiva, formando strutture ad "albero di Miller" durante la trascrizione del rDNA.
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• Le parole chiave UniProt evidenziano che POLR1B è una fosfoproteina e contiene domini zinc-finger, indicando ruoli nel legame con metalli e nella regolazione mediata da fosforilazione.

• Lo splicing alternativo genera isoforme distinte e le varianti sono state associate a malattie, sebbene patologie specifiche non siano dettagliate.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting (WB), ci si aspetta una banda intorno a 128 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE al 6–8% per una risoluzione ottimale e validare il rilevamento nei tuoi lisati cellulari specifici umani o di topo.
• Quando si esegue l'ELISA, considerare l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e delle diluizioni dell'anticorpo utilizzando l'immunogeno ricombinante come standard per garantire un rilevamento robusto del segnale.
• Essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere più epitopi; includere appropriati controlli negativi per confermare la specificità nel tuo sistema di saggio.
• Conservare l'anticorpo come raccomandato al ricevimento (la spedizione in sacca di ghiaccio suggerisce conservazione a -20°C o inferiore) per mantenerne la stabilità.

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