Anticorpo policlonale Anti-POLR2B per WB, IHC-P, ELISA - P30876

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di POLR2B

• POLR2B (subunità B della RNA polimerasi II, RPB2) è la seconda subunità più grande della RNA polimerasi II (Pol II), l'enzima che sintetizza i precursori dell'mRNA e numerosi RNA non codificanti in modo dipendente dal DNA. Riferimenti correlati: PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:9852112
• Insieme alla subunità più grande POLR2A/RPB1, POLR2B forma il centro catalitico, coordinando due ioni Mg²⁺ e fornendo residui di lisina che facilitano l'appaiamento di basi di Watson-Crick durante l'aggiunta di nucleotidi. Riferimenti correlati: PMID:30190596 PMID:9852112
• POLR2B possiede un'attività intrinseca di proofreading esonucleasica 3′→5′ che corregge i ribonucleotidi erroneamente incorporati tornando indietro sull'RNA nascente e scindendo il legame fosfodiesterico. Riferimenti correlati: PMID:8381534
• Oltre alla trascrizione dipendente dal DNA, POLR2B catalizza la polimerizzazione dell'RNA diretta dall'RNA, estendendo l'estremità 3′ di alcuni RNA non codificanti utilizzando un modello interno, il che può ridurre la stabilità degli ncRNA repressivi.
• La proteina si localizza esclusivamente nel nucleo, in coerenza con il suo ruolo trascrizionale.
• POLR2B è soggetto a fosforilazione e metilazione regolatorie e contiene motivi a dito di zinco che probabilmente contribuiscono alla sua integrità strutturale e alle interazioni con gli acidi nucleici.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai 260 amminoacidi N-terminali di POLR2B umano. Questa regione è adatta per rilevare la proteina full-length di ~134 kDa nel western blot; confermare la specificità utilizzando controlli di knockdown o knockout.
• Per l'immunohistochimica (IHC-P), considerare di ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo primario, poiché i tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina possono richiedere condizioni diverse.
• Questo anticorpo riconosce POLR2B di uomo, topo e ratto; convalidare nel sistema di campione pertinente quando si passa tra specie diverse.
• In ELISA, utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione secondo il formato del saggio; effettuare un controllo incrociato con uno standard noto.

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