Anticorpo policlonale anti-POLR2D per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O15514

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di POLR2D

• POLR2D, nota anche come RPB4, RPB16 o subunità D della RNA polimerasi II DNA-dipendente, è una subunità fondamentale della RNA polimerasi II (Pol II), responsabile della sintesi dei precursori dell'mRNA e degli RNA non codificanti.
• Forma un sottocomplesso stabile con POLR2G/RPB7, che si lega a una tasca specifica formata dalle subunità maggiori RPB1, RPB2 e RPB6 alla base dell'elemento a pinza della Pol II.
• Il sottocomplesso POLR2D/RPB4-POLR2G/RPB7 blocca la pinza in una conformazione chiusa attraverso POLR2G/RPB7, impedendo al DNA a doppio filamento di entrare nella fessura del sito attivo e regolando così l'inizio della trascrizione.
• Questo sottocomplesso possiede inoltre attività di legame al DNA e all'RNA a singolo filamento, contribuendo alla processività della polimerasi e alla stabilizzazione dei trascritti.
• POLR2D è localizzata esclusivamente nel nucleo, in linea con il suo ruolo nella trascrizione basata su stampo di DNA.
• Secondo UniProt, questa proteina fa parte del proteoma di riferimento ed è stata identificata mediante studi di identificazione proteomica e di struttura tridimensionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante comprendente gli amminoacidi 1-142, corrispondenti alla sequenza completa di POLR2D. Questo design dovrebbe garantire un'elevata specificità per la proteina nativa.
• Data l'elevata identità di sequenza tra POLR2D umana e murina, si prevede che l'anticorpo reagisca in modo affidabile anche nei campioni di topo, come confermato dalla validazione del fornitore.
• La rilevazione mediante Western blot (WB) dovrebbe produrre una banda prominente a circa 16 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati per confermare la dimensione.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), prevedere una colorazione esclusivamente nucleare; eseguire una controcolorazione con DAPI per confermare la colocalizzazione.
• Negli esperimenti di immunoprecipitazione (IP), l'anticorpo può precipitare il sottocomplesso POLR2D–POLR2G, consentendo l'analisi delle interazioni tra le subunità della Pol II.

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