Anticorpo policlonale anti-POLR3C per WB, ELISA - Q9BUI4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di POLR3C

• La subunità RPC3 della RNA polimerasi III diretta dal DNA (nota anche come RPC62 o POLR3C) è un componente periferico specifico del complesso della RNA polimerasi III (Pol III), responsabile della sintesi di piccoli RNA non codificanti, tra cui 5S rRNA, tRNA, snRNA e miRNA, a partire da almeno 500 distinti loci genomici. Riferimenti correlati: PMID:20413673, PMID:33558764, PMID:33558766

• In quanto parte dell'eterotrimero POLR3C/RPC3-POLR3F/RPC6-POLR3G/RPC7, coordina la dinamica dei moduli stalk e clamp della Pol III durante la transizione dallo stato apo allo stato di elongazione, un processo fondamentale per un'iniziazione e un'elongazione efficienti della trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:33558764, PMID:33558766

• Oltre al suo ruolo nella trascrizione, POLR3C funge da sensore del DNA nucleare e citosolico nell'immunità innata. È in grado di rilevare il dsDNA non self e trascriverlo in dsRNA, inducendo successivamente l'interferone di tipo I e NF-κB attraverso la via RIG-I, contribuendo così alla difesa antivirale. Riferimenti correlati: PMID:19609254, PMID:19631370

• POLR3C si lega preferenzialmente al DNA a singolo filamento (ssDNA) in modo indipendente dalla sequenza, il che può facilitare le sue funzioni di rilevamento del DNA e di polimerasi. Riferimenti correlati: PMID:21358628

• La proteina è localizzata nel nucleo, in accordo con il suo ruolo primario nella trascrizione.

• POLR3C è una fosfoproteina e le sue modificazioni post-traduzionali possono regolarne l'attività e le interazioni all'interno del complesso Pol III e delle vie di segnalazione immunitaria.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (amminoacidi 1-270) della POLR3C umana, un dominio probabilmente conservato tra le specie, a supporto della reattività crociata osservata con topo e ratto. Per le applicazioni in queste specie, si raccomanda la validazione nel sistema del campione pertinente.
• Nel Western blot, la banda attesa appare a circa 61 kDa. A causa di potenziali modificazioni post-traduzionali o variazioni delle isoforme, possono verificarsi lievi variazioni del peso molecolare; pertanto, è necessario includere adeguati controlli di caricamento e marker di peso molecolare.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rilevamento; tuttavia, le diluizioni e le condizioni ottimali devono essere determinate empiricamente utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.
• Essendo un anticorpo policlonale, questo reagente riconosce epitopi multipli, il che può aumentare la robustezza del segnale nei saggi di rilevamento. Tuttavia, per le applicazioni quantitative critiche è necessario verificare la coerenza tra i diversi lotti.

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