Anticorpo policlonale di coniglio Anti-POLR3K per WB, ELISA - Q9Y2Y1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di POLR3K

• La subunità RPC10 della RNA polimerasi III diretta da DNA (conosciuta anche come POLR3K, RPC10, RPC11, RPC12.5) è un componente fondamentale della RNA polimerasi III (Pol III) (PubMed:20413673, PubMed:30584594, PubMed:33335104).
  Riferimenti correlati: PMID:20413673, PMID:30584594, PMID:33335104

• La Pol III sintetizza piccoli RNA non codificanti e svolge un ruolo cruciale nella fedeltà della trascrizione mediando la correzione di bozze e la scissione di nucleotidi errati incorporati (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Riferimenti correlati: PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• Dopo aver raggiunto il segnale di terminazione poli(dT), POLR3K induce l'apertura della pinza della Pol III e la terminazione della trascrizione (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Riferimenti correlati: PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• POLR3K funziona come sensore di DNA nucleare e citosolico coinvolto nella risposta immunitaria innata; riconosce il dsDNA non proprio da batteri intracellulari e virus a DNA, portando alla trascrizione in dsRNA che attiva le vie dell'interferone di tipo I e NF-kappa-B tramite RIG-I (PubMed:19609254, PubMed:19631370).
  Riferimenti correlati: PMID:19609254, PMID:19631370

• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare.

• Contiene motivi a dito di zinco ed è una proteina che lega metalli, elemento essenziale per la sua attività catalitica.

• Le mutazioni in POLR3K sono associate a leucodistrofia e neurodegenerazione, sottolineando la sua importanza per la salute neurologica.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-108 di POLR3K umano (NP_057394.3), che comprende la proteina full-length. Questo progetto dovrebbe produrre anticorpi che riconoscono sia la forma nativa che quella denaturata, supportando le applicazioni di WB e ELISA.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare lisati di cellule umane (ad esempio HeLa, HEK293) come controllo positivo. Il peso molecolare previsto è 12 kDa, ma i livelli di espressione endogena possono variare; si raccomanda di ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario e le condizioni di incubazione.
• Quando si esegue l'ELISA, convalidare l'anticorpo con l'immunogeno o il peptide per stabilire una curva standard. La reattività crociata con altre specie non è stata testata, quindi confermare la specificità nel vostro sistema modello.
• Essendo un anticorpo policlonale, possono verificarsi variabilità tra lotti; raccomandiamo di includere controlli interni ed eseguire una convalida specifica per lotto negli esperimenti critici.

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