Anticorpo policlonale di coniglio anti-POLRMT per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O00411

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della POLRMT

• Il gene POLRMT codifica la RNA polimerasi mitocondriale DNA-dipendente della matrice mitocondriale, essenziale per la trascrizione del genoma mitocondriale in RNA utilizzando nucleosidi trifosfato come substrati. Riferimenti correlati: PMID:21278163, PMID:33602924
• Come parte del complesso di inizio della trascrizione mitocondriale, POLRMT si associa a TFB2M e TFAM per consentire il riconoscimento e l'apertura del promotore durante la trascrizione basale del DNA mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:29149603
• POLRMT possiede inoltre attività di DNA primasi, sintetizzando brevi primer di RNA necessari per la replicazione del DNA del filamento ritardato a partire dall'origine della sintesi del filamento leggero (OriL). Riferimenti correlati: PMID:18685103, PMID:33602924
• L'enzima è localizzato nei mitocondri, in linea con il suo ruolo nell'espressione genica mitocondriale.
• POLRMT appartiene alla famiglia delle RNA polimerasi DNA-dipendenti e contiene un peptide segnale per l'importazione mitocondriale.
• Le mutazioni di POLRMT sono associate a malattie mitocondriali primarie, come la COXPD55, evidenziandone l'importanza clinica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un frammento ricombinante che comprende gli amminoacidi 42–230 della POLRMT umana; si prevede che l'anticorpo policlonale riconosca la POLRMT a lunghezza completa, ma per applicazioni innovative si raccomanda la mappatura degli epitopi.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 139 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE appropriato, ad esempio al 6–8%, e validare la banda nel proprio sistema sperimentale.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), è previsto un pattern di colorazione mitocondriale; si consiglia la co-colorazione con un marcatore mitocondriale.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), confermare le prestazioni dell'anticorpo in condizioni native; la pre-clarificazione e controlli adeguati sono essenziali.
• L'anticorpo è stato testato su campioni umani e di ratto; non è stata segnalata la reattività crociata con altre specie, come il topo; validare se necessario.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati e titolare l'anticorpo per ciascuna applicazione.

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