Anticorpo policlonale coniglio anti-POMGNT1 per WB, ELISA - Q8WZA1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di POMGNT1

• POMGNT1 (Proteina O-linked-mannose beta-1,2-N-acetilglucosaminiltransferasi 1) è una glicosiltransferasi residente nell'apparato di Golgi, designata anche GnT I.2, essenziale per la via dei glicani O-mannosilici.
• POMGNT1 catalizza il trasferimento di N-acetilglucosammina (GlcNAc) ai residui di mannosio O-legati sulla alfa-distroglicana e altre proteine O-mannosilate, formando il nucleo GlcNAc(β1-2)Man(α1-)O-Ser/Thr. È specifica per il mannosio terminale alfa-legato e priva di attività MGAT3/4/5/7/8 (PubMed:11709191, PubMed:27493216, PubMed:28512129). Riferimenti correlati: PMID:11709191 PMID:27493216 PMID:28512129
• Il gene subisce splicing alternativo, producendo multiple isoforme che possono contribuire alla regolazione specifica per tessuto della O-mannosilazione.
• POMGNT1 è ancorata nella membrana dell'apparato di Golgi tramite un dominio transmembrana di segnale-ancoraggio, dove svolge la sua funzione di glicosilazione.
• È espressa costitutivamente, con livelli relativamente più alti rilevati nel midollo spinale, nel linfonodo e nella trachea; si osserva una forte espressione anche negli astrociti e nei neuroni immaturi e maturi.
• Le mutazioni in POMGNT1 causano uno spettro di distroglicanopatie, inclusa la distrofia muscolare congenita, la distrofia muscolare degli cinture (LGMD2O/LGMDR15) e la retinite pigmentosa.
• La proteina contiene caratteristiche strutturali tipiche delle glicosiltransferasi: ponti disolfuro, siti di fosforilazione e un dominio di legame metallico dipendente dal manganese.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 411–660 di POMGNT1 umano (regione C-terminale); l'anticorpo policlonale risultante può riconoscere multiple isoforme ed è adatto per rilevare la proteina a lunghezza intera (~75 kDa).
• Per il western blot, considerare l'uso di lisati proteici da tessuti umani, murini o di ratto con espressione nota di POMGNT1 (es. cervello, muscolo scheletrico) e validare con controlli positivi e negativi.
• Quando si esegue un ELISA, l'anticorpo può essere valutato come reagente di cattura o di rilevamento; includere un bloccaggio appropriato e ottimizzare i fattori di diluizione per il formato specifico del saggio.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, la coerenza tra i lotti deve essere verificata e si raccomanda un'ulteriore ottimizzazione della diluizione per ogni applicazione e tipo di campione.

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