Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PP2A-Aα/PR65α/PPP2R1A per WB, IF/ICC, ELISA - P30153

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PP2A-Aα/PR65α/PPP2R1A

• PR65/PPP2R1A è l'isoforma alfa della subunità regolatrice A di 65 kDa della serina/treonina-proteina fosfatasi 2A (PP2A), codificata dal gene PPP2R1A (nomi alternativi: PP2AA, PR65A). Funge da molecola impalcatura che coordina l'assemblaggio della subunità catalitica e di una variabile subunità regolatrice B. Riferimenti correlati: PMID:15525651, PMID:16580887, PMID:33243860
• La proteina è essenziale per la corretta segregazione cromosomica e la localizzazione centromerica di SGO1 durante la mitosi, garantendo la stabilità genetica. Riferimenti correlati: PMID:16580887
• Attraverso il suo ruolo di impalcatura, PR65/PPP2R1A è un componente chiave dei complessi STRIPAK (striatin-interacting phosphatase and kinase), che regolano vie di segnalazione tra cui Hippo, MAPK e le vie dei recettori nucleari, ed sono coinvolti nella crescita, differenziazione e apoptosi cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18782753, PMID:33633399
• Come parte del complesso Integrator-PP2A (INTAC), media un checkpoint di qualità durante l'elongazione trascrizionale promuovendo la defosforilazione del dominio C-terminale (CTD) dell'RNA polimerasi II e del fattore di elongazione SUPT5H/SPT5, portando alla terminazione prematura di trascritti configurati sfavorevolmente. Riferimenti correlati: PMID:33243860, PMID:34004147
• Insieme all'adattatore RACK1, PR65/PPP2R1A media la defosforilazione di AKT1 in Ser-473, prevenendo l'attivazione di AKT1 e la segnalazione a valle di mTOR; questa attività è cruciale per l'omeostasi delle cellule T regolatorie.
• PR65/PPP2R1A si localizza in numerosi compartimenti subcellulari tra cui citoplasma, nucleo, centromeri, membrana cellulare laterale e dendriti, riflettendo le sue funzioni diversificate.
• La proteina contiene ripetizioni HEAT ed è soggetta ad acetilazione; è identificata mediante sequenziamento proteico diretto ed è implicata in varianti patologiche inclusa la disabilità intellettiva, nonché nelle interazioni ospite-virus.
• Regola il reclutamento del complesso SKA ai cinetocori, contribuendo all'assemblaggio del fuso mitotico e all'allineamento cromosomico. Riferimenti correlati: PMID:28982702

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-270 di PP2A-Aα/PR65α/PPP2R1A umano, una regione che include multiple ripetizioni HEAT; le prestazioni dell'anticorpo possono essere influenzate da modificazioni post-traduzionali o differenze isoforma-specifiche. Validare la specificità nel sistema di campioni rilevante.
• Per il Western blot, si osserva una banda attesa attorno a 65 kDa in lisati cellulari umani, murini e di ratto. Utilizzare controlli appropriati e considerare la distribuzione nucleare e citoplasmatica della proteina.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, possono essere osservati segnali nucleari puntiformi e centromerici; le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per preservare l'accessibilità dell'epitopo.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o la proteina nativa; si raccomandano esperimenti di titolazione per determinare le diluizioni ottimali dell'anticorpo.

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