Anticorpo policlonale anti-PP2A-B56δ/PR61δ/PPP2R5E per WB, ELISA - Q16537

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PP2A-B56δ/PR61δ/PPP2R5E

• L'isoforma epsilon della subunità regolatoria da 56 kDa della fosfatasi proteica 2A serina/treonina (PPP2R5E) è una subunità B regolatoria dell'oloenzima eterotrimerico PP2A, denominata B56δ/PR61δ. È nota anche come isoforma epsilon della subunità B' di PP2A o B56-epsilon.
• Si propone che la subunità B regolatoria moduli la selettività per i substrati e l'attività catalitica dell'enzima core PP2A, influenzando così la defosforilazione di diversi bersagli coinvolti nella segnalazione cellulare, nel ciclo cellulare e nell'apoptosi.
• Appartiene alla famiglia B56 (PR61) delle subunità regolatorie, caratterizzate da un dominio centrale conservato e da estremità N- e C-terminali variabili, che spesso forniscono segnali di indirizzamento subcellulare.
• La proteina è localizzata prevalentemente nel citoplasma, come indicato dall'annotazione UniProt, suggerendo un ruolo negli eventi di defosforilazione citosolica.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione (annotate mediante analisi proteomiche su larga scala), mentre il gene è soggetto a splicing alternativo, che può generare molteplici isoforme.
• Parole chiave: struttura 3D, acetilazione, splicing alternativo, citoplasma, sequenziamento diretto delle proteine, fosfoproteina, identificazione proteomica, proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente ai residui 50–150 (sulla base di NP_006237.1). Se si desidera la cross-reattività con gli ortologhi, è consigliabile allineare questa regione tra le diverse specie; il prodotto mostra già reattività con il ratto.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto è di circa 55 kDa. Dovrebbero essere osservate bande di queste dimensioni; bande aggiuntive possono derivare da isoforme alternative o da modifiche post-traduzionali: convalidare utilizzando controlli appropriati o il knockdown mediante siRNA nella linea cellulare pertinente.
• Nell'ELISA, utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione secondo i protocolli standard di ELISA indiretto. L'ottimizzazione del flusso di lavoro può richiedere la titolazione dell'anticorpo e dell'antigene.
• L'anticorpo è prodotto nel coniglio, pertanto per la rilevazione sono necessari coniugati secondari anti-IgG di coniglio. Assicurarsi che i tamponi di blocco e le condizioni di lavaggio siano ottimizzati per ridurre al minimo il fondo elevato.

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