Anticorpo Policlonale Anti-PPAT per WB, IF/ICC, ELISA - Q06203

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PPAT

• PPAT, noto anche come glutammina fosforibosilpirofosfato amidotransferasi (GPAT), è l'enzima responsabile della catalisi del primo passo impegnativo della biosintesi de novo delle purine.
• Converte il fosforibosilpirofosfato (PRPP) e la glutammina in fosforibosilammina, un precursore critico per la sintesi dei nucleotidi purinici.
• L'enzima contiene un cluster ferro-zolfo 4Fe-4S e richiede magnesio come cofattore per l'attività catalitica.
• PPAT è soggetto a regolazione allosterica e acetilazione post-traduzionale, che ne modulano l'attività in risposta alle richieste nucleotidiche cellulari.
• Il suo pattern di espressione ubiquo riflette il ruolo di "housekeeping" della biosintesi delle purine in tutti i tessuti.
• Con un peso molecolare di circa 57 kDa (57,4 kDa previsto dalla sequenza), PPAT è un bersaglio comune negli studi proteomici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, un intervallo di diluizione iniziale consigliato è 1:500 a 1:2000; l'ottimizzazione è essenziale per ottenere segnali specifici e chiari.
• Lisati di controllo positivo possono essere preparati da linee cellulari ampiamente disponibili (es. HeLa, HEK293) o da tessuti di topo/ratto, data l'espressione ubiqua di PPAT.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, i protocolli di fissazione e permeabilizzazione appropriati dovrebbero essere testati per garantire l'accessibilità dell'anticorpo al bersaglio.
• Quando si utilizza per ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento corrispondente e validare nella matrice del campione rilevante.
• È stata osservata reattività crociata con PPAT di topo e ratto; tuttavia, si raccomanda una validazione individuale nel sistema sperimentale specifico.

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