Anticorpo policlonale coniglio Anti-PPM1A per WB, IF/ICC, ELISA - P35813

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PPM1A

• PPM1A (Protein phosphatase 1A), nota anche come PP2Cα o PP2CA, è una serina/treonina fosfatasi codificata dal gene PPM1A nell'uomo. Appartiene alla famiglia PP2C delle fosfatasi proteiche dipendenti da metalli.
• Funziona come enzima a ampia specificità che regola negativamente la segnalazione TGF-beta defosforilando SMAD2 e SMAD3, provocandone la dissociazione da SMAD4 e l'esportazione nucleare, terminando così il segnale.
• PPM1A svolge un ruolo fondamentale nell'attenuazione dell'attivazione di NF-kappa-B mediata da TNF, defosforilando e inattivando la chinasi IKBKB/IKKβ.
• Defosforila anche le subunità AMPK PRKAA1 e PRKAA2, il che la implica nelle vie dell'omeostasi energetica.
• Subcellularmente, PPM1A si trova nel nucleo, nel citoplasma, nel citosol e in compartimenti associati alla membrana, in linea con i suoi diversi ruoli nella segnalazione cellulare.
• La proteina subisce splicing alternativo, è miristoilata e viene essa stessa fosforilata. Richiede ioni magnesio o manganese come cofattori per l'attività catalitica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 161-370) della PPM1A umana, che può conferire specificità per l'isoforma canonica PP2Cα; verificare le prestazioni nel sistema di campione pertinente.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 42 kDa; considerare di caricare controlli positivi appropriati (ad es. lisati di HeLa o HEK293) e ottimizzare le condizioni di blocco.
• Per immunofluorescenza/ICC, i metodi di permeabilizzazione e fissazione possono influenzare la rilevazione delle pools nucleari e citoplasmatiche; convalidare i marcatori di co-localizzazione.
• Se utilizzata in ELISA, l'anticorpo può essere adatto sia come reagente di cattura che di rilevazione; eseguire la cross-titolazione per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.
• Dato che la reattività incrociata è confermata per uomo, mouse e ratto, il segnale specifico per specie deve essere convalidato con estratti di tessuti endogeni o linee cellulari.

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