Anticorpo policlonale di coniglio anti-PPP1R14A (CPI-17) per WB ed ELISA - Q96A00

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PPP1R14A

• La subunità regolatrice 14A della protein fosfatasi 1 (PPP1R14A), nota anche come CPI-17, è un potente inibitore della subunità catalitica della protein fosfatasi 1 (PPP1CA).
• La fosforilazione di CPI-17 ne potenzia l'attività inibitoria di oltre 1000 volte, agendo come un interruttore molecolare che modula la fosforilazione dei substrati di PPP1CA e regola quindi la contrazione della muscolatura liscia.
• La proteina esiste in almeno due isoforme generate da splicing alternativo; l'isoforma 1 è rilevata nell'aorta e nei testicoli, mentre l'isoforma 2 è presente nell'aorta.
• PPP1R14A si localizza nel citoplasma, in accordo con il suo ruolo nella regolazione dell'attività delle fosfatasi citosoliche.
• In quanto fosfoproteina, la sua attività è probabilmente controllata da chinasi come la protein chinasi C (PKC), collocandola come nodo chiave nelle vie di trasduzione del segnale che regolano il tono muscolare.
• La fosforilazione post-traduzionale e la sua attività di inibitore delle fosfatasi ne sottolineano l'importanza nella ricerca proteomica e sulla segnalazione cellulare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che comprende la PPP1R14A umana a lunghezza intera (aa 1–147). Pertanto, l'anticorpo è stato prodotto contro l'intera proteina e può rilevare sia le forme fosforilate sia quelle non fosforilate; utilizzare inibitori delle fosfatasi nella preparazione dei campioni se lo stato di fosforilazione è rilevante.
• Per il Western blot, si prevede una banda a circa 17 kDa. Si consiglia di utilizzare controlli positivi appropriati, come lisati di tessuto della muscolatura liscia (ad es. aorta) o linee cellulari che esprimono PPP1R14A.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere impiegato per la rilevazione diretta o indiretta, ma le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate sperimentalmente. L'uso combinato con uno specifico anticorpo di rilevazione anti-CPI-17 può migliorare la sensibilità.
• È riportata una reattività crociata con topo e ratto, facilitando gli studi traslazionali nei modelli di roditori; tuttavia, si raccomanda la validazione nella specie e nel tessuto pertinenti prima di esperimenti su larga scala.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, possono verificarsi lievi variazioni tra diversi lotti; includere un campione di controllo standardizzato in ogni esperimento per garantire la coerenza.

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