Anticorpo policlonale di coniglio Anti-PPP1R15A (GADD34) per WB, IF/ICC, ELISA - O75807

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PPP1R15A

• Identità proteica: Conosciuto anche come GADD34, proteina indotta dall'arresto della crescita e dal danno al DNA, omologo di MyD116. Codificato dal gene PPP1R15A (GeneID: 23645, SWISS: O75807). Peso molecolare UniProt ~73,5 kDa; osservato ~73 kDa.
• Funzione principale: Recluta la fosfatasi proteica 1 (PP1) per defosforilare il fattore di inizio della traduzione eIF-2A, invertendo l'arresto della sintesi proteica indotto dallo stress e facilitando il recupero cellulare dopo lo stress. Riferimenti correlati: PMID:26095357 PMID:26742780
• Modulazione della via TGF-β: Downregola la segnalazione TGF-beta promuovendo la defosforilazione di TGFB1 mediata da PP1. Riferimenti correlati: PMID:14718519
• Apoptosi: Può promuovere l'apoptosi indurre la fosforilazione di p53 sulla Serina-15. Riferimenti correlati: PMID:14635196
• Autofagia: Essenziale per un'autofagia sostenuta regolando la traduzione durante la fame, permettendo così la biogenesi lisosomiale e il flusso autofagico. Riferimenti correlati: PMID:32978159
• Fattore di restrizione virale: Attenua la replicazione dell'HIV-1 inibendo la traduzione mediata dall'RNA TAR. Riferimenti correlati: PMID:31778897
• Infezione microbica: Promuove la replicazione dell'enterovirus 71 mediando l'attività del sito di ingresso interno dei ribosomi (IRES) della 5'-UTR virale.
• Localizzazione subcellulare: Si associa alla membrana del reticolo endoplasmatico e alla membrana esterna mitocondriale.
• Modifiche post-traduzionali: È soggetto a fosforilazione e coniugazione ubiquitina (ubiquitinazione).
• Lo splicing alternativo genera più isoforme di trascritto.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 375-674 di PPP1R15A umano, e copre una regione C-terminale. L'anticorpo policlonale ottenuto può riconoscere più isoforme o forme modificate.
• Per Western blot (WB) è prevista una banda intorno ai 73 kDa; possono comparire bande aggiuntive a causa di modifiche post-traduzionali o splicing alternativo. Il pretrattamento dei campioni con inibitori della fosfatasi può aiutare a preservare i segnali dipendenti dalla fosforilazione.
• In IF/ICC, tieni conto che GADD34 è localizzato a livello di RE e mitocondri; la co-colorazione con marcatori di organelli può facilitare la verifica. È tipicamente richiesta la permeabilizzazione con detergenti (ad esempio 0,1% Triton X-100).
• L'anticorpo ha reattività crociata con campioni di uomo, topo e ratto. Esegui la validazione nel tuo specifico sistema modello e includi controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio cellule indotte dallo stress vs cellule non trattate).
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e delle condizioni di rilevazione; l'immunogeno ricombinante può essere utilizzato come controllo positivo.

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