Anticorpo policlonale di coniglio anti-PPP4C per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P60510

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PPP4C

• PPP4C codifica per la subunità catalitica della fosfatasi proteica serina/treonina 4 (PP4), nota anche come fosfatasi proteica X (PP-X).
• PP4 è una fosfatasi ubiquitaria coinvolta in numerosi processi cellulari, inclusa l'organizzazione dei microtubuli ai centriomi, la maturazione degli snRNP spliceosomiali, l'apoptosi, la riparazione del DNA, la segnalazione TNF-alfa, l'attivazione JNK, la regolazione dell'acetilazione degli istoni, la segnalazione del checkpoint del danno al DNA, l'attivazione di NF-kappa-B e la migrazione cellulare.
• PP4 forma complessi distinti con subunità regolatorie come PPP4R1, PPP4R2 e PPP4R3A, che conferiscono specificità per il substrato: ad esempio, il complesso PPP4C-PPP4R2-PPP4R3A defosforila la gamma-H2AX nei siti di danno al DNA, mentre il complesso PPP4C-PPP4R1 potrebbe regolare HDAC3.
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel nucleo, con arricchimento al centrosoma e al centro organizzatore dei microtubuli, in linea con i suoi ruoli nella regolazione del citoscheletro e nella mitosi.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e metilazione, e l'enzima richiede manganese come cofattore per la sua attività idrolasica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogene è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-307 di PPP4C umano (NP_002711.1), che rappresenta la subunità catalitica a lunghezza intera; questo design è previsto per generare anticorpi policlonali che riconoscono più epitopi.
• Per l'analisi Western blot, è prevista una banda principale vicino a 35 kDa; tuttavia, modifiche post-traduzionali o la formazione di complessi potrebbero causare bande aggiuntive — validare nel sistema di campione pertinente.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare che PPP4C si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, con arricchimento centrosomico; dovrebbero essere testati appropriati protocolli di fissazione e permeabilizzazione.
• Per le applicazioni di immunoprecipitazione (IP) ed ELISA, è possibile utilizzare condizioni standard; notare che, essendo una preparazione policlonale, il cross-linking alle perle o l'uso di un anticorpo ponte potrebbe migliorare l'efficienza di cattura.
• È supportata la reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto, ma si raccomanda l'allineamento delle sequenze e la conferma preliminare nella specie prevista prima di saggi ad alto throughput.

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