Anticorpo monoclonale anti-proteina prionica per WB, ELISA - P04156

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della proteina prionica

• La principale proteina prionica (PrP), nota anche come PrPc, CD230 e proteina prionica (PrP27-30, PrP33-35C), è codificata dal gene PRNP nell’uomo. Esiste in più isoforme a causa dell’inizio alternativo della traduzione.
• La PrP è ancorata al foglietto esterno della membrana cellulare tramite un’ancora di glicosilfosfatidilinositolo (GPI) ed è localizzata anche nell’apparato di Golgi.
• La funzione fisiologica della PrP non è completamente compresa, ma potrebbe contribuire allo sviluppo neuronale e alla plasticità sinaptica, oltre a essere necessaria per il mantenimento della guaina mielinica neuronale.
• La PrP potrebbe promuovere l’omeostasi della mielina agendo come agonista del recettore ADGRG6 e potrebbe inoltre svolgere un ruolo nell’assorbimento e nell’omeostasi del ferro.
• Gli oligomeri solubili della PrP possono essere tossici per le cellule di neuroblastoma e indurre apoptosi in vitro, suggerendo un ruolo nella neurodegenerazione in condizioni patologiche.
• La PrP è soggetta a importanti modificazioni post-traduzionali, tra cui glicosilazione N-linked, formazione di ponti disolfuro e legame con rame/zinco, che sono importanti per la sua struttura e funzione.
• La proteina è associata a diverse malattie neurodegenerative note come malattie da prioni o encefalopatie spongiformi trasmissibili (ad es., malattia di Creutzfeldt-Jakob, sindrome di Gerstmann-Sträussler-Scheinker, insonnia familiare fatale e kuru).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L’immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente alla regione C-terminale (amminoacidi 154-253) della PrP umana, che comprende parte del nucleo resistente alla proteinasi K (PrP27-30). Questa regione è conservata tra le specie, a supporto della reattività crociata osservata con topo e ratto.
• Nell’analisi Western blot (WB), si prevede che l’anticorpo rilevi una banda a circa 28 kDa per il monomero non glicosilato; tuttavia, a causa della glicosilazione, possono essere osservate bande aggiuntive a pesi molecolari maggiori (ad es., 35-40 kDa). Per un’interpretazione accurata, considerare la deglicosilazione o confrontare con profili di glicosilazione noti.
• Per le applicazioni ELISA, assicurarsi di utilizzare condizioni appropriate di rivestimento e blocco e validare le prestazioni dell’anticorpo con controlli positivi e negativi pertinenti nella specifica matrice del campione.
• Data la capacità dell’anticorpo di riconoscere il dominio C-terminale conservato, esso potrebbe rilevare sia la PrP cellulare normale (PrPc) sia le isoforme scrapie associate alla malattia (PrPSc). Per distinguere tra queste forme, potrebbe essere necessario un trattamento con proteinasi K prima del WB o l’impiego di anticorpi conformazionali specifici.

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