Anticorpo policlonale anti-PRKCSH per WB e ELISA - P14314

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PRKCSH

• PRKCSH codifica per la sottounità beta della glucosidasi 2 (nota anche come proteina 80K-H o PKCSH), un regolatore chiave della lavorazione degli N-glicani.
• Agisce come sottounità regolatrice della glucosidasi II, che cliva i due residui di glucosio α-1,3 più interni dai precursori oligosaccaridici Glc₂Man₉GlcNAc₂ delle glicoproteine immaturo. Riferimenti correlati: PMID:10929008
• Questo "trimming" del glucosio è critico per il ripiegamento delle glicoproteine e per il controllo di qualità del RE, assicurando che solo le proteine correttamente ripiegate escano dal RE.
• PRKCSH è necessario per una biogenesi efficiente di PKD1/polycistin-1 e per il traffico verso la membrana plasmatica del ciglio primario.
• La proteina localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico.
• Contiene domini di legame del calcio ed è essa stessa una glicoproteina; i dati di fosfoproteomica pubblicati identificano molteplici siti di fosforilazione.
• Le mutazioni in PRKCSH causano la malattia epatica policistica autosomica dominante (PCLD).
• Lo splicing alternativo produce multiple varianti di trascrizione, aggiungendo diversità funzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione centrale (aa 130–275) di PRKCSH umano; ci si aspetta che l'anticorpo policlonale riconosca sia la forma a lunghezza intera che potenziali varianti di splicing o frammenti contenenti questo epitopo.
• Per il Western blot, si prevede una banda principale vicino a 59 kDa. Si raccomandano condizioni riducenti e denaturanti; esperimenti pilota dovrebbero confermare la specificità.
• Nell'ELISA, è possibile utilizzare la proteina PRKCSH ricombinante o lisati cellulari di origine umana, murina o ratto come reagenti di cattura/rilevamento. Ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e le condizioni di rilevamento.
• La reattività incrociata riportata con mouse e ratto suggerisce che l'epitopo è conservato; tuttavia, è consigliato l'allineamento delle sequenze e test preliminari quando si lavora con campioni non umani.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, possono verificarsi variabilità da lotto a lotto. Titolare l'anticorpo nel sistema di saggio specifico e includere appropriati controlli positivi/negativi.

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