Anticorpo policlonale di coniglio anti-PRKRIP1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9H875

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PRKRIP1

• Identità della proteina e alias: PRKRIP1 (proteina 1 interagente con PRKR), nota anche come C114 e KRBOX3, è una proteina nucleare di 21 kDa codificata dal gene PRKRIP1 (GeneID: 79706) nell'uomo, con ortologhi conservati tra le specie.
• Funzione principale nello splicing: PRKRIP1 è necessaria per lo splicing del pre-mRNA in quanto componente integrante dello spliceosoma, il complesso macromolecolare responsabile della rimozione degli introni e della ligazione degli esoni. Riferimenti correlati: PMID:28502770 PMID:30705154
• Legame all'RNA: Si lega all'RNA a doppio filamento, una caratteristica che potrebbe collegarla al riconoscimento del substrato o alle interazioni regolatorie durante lo splicing.
• Inibizione della chinasi: PRKRIP1 inibisce l'attività chinasica di EIF2AK2 (PKR), una proteina coinvolta nelle risposte antivirali e nella segnalazione dello stress, sebbene questa inibizione sia stata dedotta dalla similarità di sequenza.
• Localizzazione subcellulare: La proteina si localizza prevalentemente nel nucleo, con un arricchimento osservato nel nucleolo, in accordo con il suo ruolo nel processamento dell'RNA.
• Splicing alternativo e diversità strutturale: PRKRIP1 è soggetta a splicing alternativo, generando molteplici isoforme; la sua sequenza include domini coiled-coil predetti che possono mediare le interazioni proteina-proteina.
• Classificazione nello spliceosoma: Le parole chiave di UniProt classificano PRKRIP1 nelle categorie spliceosoma, processamento dell'mRNA e splicing dell'mRNA, sottolineandone la partecipazione essenziale alla regolazione dello splicing costitutivo e possibilmente alternativo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 67–134 di PRKRIP1 umano, una regione che può essere conservata tra le specie; si consiglia di verificare l'identità della sequenza nel topo e nel ratto per prevedere la reattività crociata.
• Per il Western blot (WB), è attesa una banda intorno a 21 kDa; potrebbe essere necessario ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo per i singoli tipi di campione.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), è necessario validare le condizioni di permeabilizzazione e i pattern di colorazione nucleare, incluso l'arricchimento nucleolare, possono fungere da controllo positivo della localizzazione.
• Quando si utilizza l'ELISA, includere controlli appropriati e valutare strategie di rivestimento con l'antigene per garantire un rilevamento accurato.
• Data la natura policlonale di questo anticorpo, la coerenza tra i diversi lotti in applicazioni come WB e IF deve essere confermata mediante esperimenti preliminari.

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