Anticorpo monoclonale anti-PRMT5 per WB, IHC-P, ELISA - O14744

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PRMT5

• PRMT5 è una metiltransferasi di arginina di tipo II che catalizza la dimetilazione simmetrica dei residui di arginina, con una preferenza per la formazione di monometilarginina (MMA) rispetto alla dimetilarginina simmetrica (sDMA) (PubMed:10531356, PubMed:11152681, PubMed:11747828). Riferimenti correlati: PMID:10531356, PMID:11152681, PMID:11747828
• Metila specificamente le proteine Sm D1 (SNRPD1) e D3 (SNRPD3), una modifica critica per l'assemblaggio e la biogenesi delle particelle core snRNP e quindi per lo splicing del pre-mRNA (PubMed:11747828, PubMed:12411503, PubMed:17709427). Riferimenti correlati: PMID:11747828, PMID:12411503, PMID:17709427
• PRMT5 agisce come un corepressore trascrizionale metilando l'istone H4 alla Arg-3 (H4R3) e l'istone H3 alla Arg-8; si lega e reprime i promotori dei geni della gamma-globina HBG1/HBG2 in congiunzione con LYAR (PubMed:25092918). Riferimenti correlati: PMID:25092918
• È localizzato nel citoplasma, nucleo, cromosoma e apparato di Golgi, indicando il suo coinvolgimento sia nei processi nucleari (regolazione trascrizionale, splicing dell'RNA) che citoplasmatici (trasduzione del segnale).
• I principali substrati non istonici includono EGFR, RAF1, p53/TP53, POLR2A e le proteine Piwi, attraverso le quali PRMT5 modula la segnalazione EGF, le risposte al danno del DNA e la terminazione della trascrizione della RNA polimerasi II (PubMed:21258366, PubMed:21917714, PubMed:19011621, PubMed:26700805). Riferimenti correlati: PMID:21258366, PMID:21917714, PMID:19011621, PMID:26700805

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che mappa gli amminoacidi 1-100 del PRMT5 umano. Si prevede che l'anticorpo riconosca la regione N-terminale; verificare l'epitopo se è richiesto un mapping preciso.
• Per il Western blot, è prevista una banda di circa 73 kDa; considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari note per esprimere PRMT5 (es. HeLa, HEK293) come controlli positivi.
• Per l'immunoistochimica (sezioni incluse in paraffina), potrebbero essere necessari protocolli standard di recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6.0); validare la colorazione in un pannello di tessuti rilevante.
• A causa dell'alta conservazione della sequenza tra umano, mouse e ratto, si prevede che l'anticorpo presenti reattività crociata; tuttavia, validare sempre nella specie e nel sistema sperimentale di interesse.

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