Anticorpo Policlonale Rabbit Anti Recettore del Progesterone per WB, IHC-P, ELISA - P06401

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Recettore del Progesterone

• Il recettore del progesterone (PR), codificato dal gene PGR/NR3C3, appartiene alla superfamiglia dei recettori nucleari ed è un fattore di trascrizione attivato da ligandi che regola l'espressione dei geni bersaglio in risposta al progesterone.
• PR esiste in due isoforme principali, PR-A e PR-B, prodotte tramite l'utilizzo di promotori alternativi e splicing alternativo. PR-B contiene un dominio di attivazione N-terminale aggiuntivo (AF3) assente in PR-A, che permette risultati trascrizionali specifici per ciascuna isoforma.
• A seconda dell'isoforma, PR funziona come attivatore o repressore trascrizionale. PR-B è generalmente un attivatore più forte dei promotori responsivi al progesterone, mentre PR-A può agire come repressore transdominante di altri recettori ormonali steroidei, tra cui PR-B, il recettore dei mineralcorticoidi (MR) e il recettore degli estrogeni (ER).
• Dopo la stimolazione ormonale, PR è coinvolto nell'attivazione della segnalazione MAPK dipendente da SRC, collegando l'azione del progesterone a cascate di segnalazione non genomiche rapide.
• PR è implicato nella funzione mitocondriale; il PR legato al progesterone aumenta il potenziale della membrana mitocondriale e la respirazione cellulare, suggerendo un ruolo nel metabolismo energetico.
• La localizzazione subcellulare di PR interessa nucleo, citoplasma e membrana esterna mitocondriale, con un traffico dinamico influenzato dal legame con l'ormone e dalle modifiche post-traduzionali.
• L'espressione tessuto-specifica è strettamente regolata nei tessuti riproduttivi: nell'epitelio uterino, l'isoforma B predomina durante la fase proliferativa, mentre l'isoforma A è la forma principale nello stroma. L'equilibrio tra le isoforme di PR è fondamentale per la normale progressione del ciclo mestruale e la funzionalità endometriale.
• PR è soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, palmitoilazione e SUMOilazione (coniugazione UBL), che modulano la sua attività, stabilità e traffico subcellulare.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1–250 di PR umano (NP_000917.3), una regione che comprende il dominio N-terminale unico dell'isoforma B e una porzione condivisa con l'isoforma A. Sebbene l'anticorpo possa riconoscere entrambe le isoforme, consigliamo di prevedere una rilevazione specifica per isoforma verificando i pattern di banda (pesi molecolari previsti: PR-B ~116 kDa, PR-A ~94 kDa; tuttavia, le bande osservate possono spostarsi a causa delle modifiche) nel sistema di campionamento di vostro interesse.
• Per Western blotting, utilizzate controlli positivi appropriati come le linee cellulari di cancro al seno T47D o MCF-7, o lisati di tessuto uterino/endometriale. Il peso proteico previsto è 99 kDa in base alla voce UniProt, ma modifiche post-traduzionali e differenze tra isoforme possono determinare la comparsa di bande multiple.
• Nell'immunistochimica (sezioni paraffinate, IHC-P), ottimizzate il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo utilizzando tessuti con espressione nota di PR (es. endometrio umano, carcinoma mammario). È prevista una colorazione nucleare; possono essere osservate anche colorazioni citoplasmatiche o mitocondriali.
• Per ELISA, assicuratevi che la configurazione dell'antigene di rivestimento o dell'anticorpo di cattura sia compatibile con la rilevazione policlonale; convalidate con proteina PR ricombinante o lisati cellulari.
• La reattività crociata con topo e ratto è confermata; tuttavia, a causa delle variazioni di sequenza specifiche per specie, confermate la reattività nel vostro modello sperimentale.

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