Anticorpo policlonale coniglio anti-Prohibitin per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P35232

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Prohibitin

• Prohibitin 1 (PHB; PHB1) è una proteina altamente conservata con funzioni pleiotropiche, tra cui l'attività di chaperone mitocondriale, la coregolazione della trascrizione nucleare e la segnalazione della membrana plasmatica, agendo in modo specifico per compartimento cellulare e tessuto (PubMed:11302691, PubMed:20959514, PubMed:28017329). Riferimenti correlati: PMID:11302691, PMID:20959514, PMID:28017329
• Nei mitocondri, PHB forma grandi complessi ad anello con PHB2 nella membrana interna, funzionando come chaperone che stabilizza gli enzimi respiratori, regola il rimodellamento della cardiolipina ed è essenziale per la morfogenesi mitocondriale e la longevità (PubMed:11302691). Questo complesso serve anche come recettore della mitofagia (PubMed:28017329). Riferimenti correlati: PMID:11302691, PMID:28017329
• PHB media l'immunità innata antivirale mitocondriale attivando la trasduzione del segnale RIG-I, portando alla produzione di interferone di tipo I (IFNB1) e della citochina pro-infiammatoria IL6 (PubMed:31522117). Riferimenti correlati: PMID:31522117
• Nel nucleo, PHB agisce come coregolatore trascrizionale, migliorando il legame al promotore TP53 mentre reprime E2F1, influenzando così il ciclo cellulare e l'apoptosi (PubMed:14500729). Interagisce anche con STAT3 per regolare la secrezione di IL17 nelle cellule Th17 (PubMed:31899195). Riferimenti correlati: PMID:14500729, PMID:31899195
• Alla membrana plasmatica, PHB coopera con CD86 nei linfociti B per modulare la produzione di IgG1 ed è necessaria per l'attivazione di NF-kappa-B mediata da CD40.
• Ampiamente espressa nei tessuti, PHB si localizza nella membrana interna mitocondriale, nel nucleo, nel citoplasma e nella membrana cellulare. È soggetta ad acetilazione e fosforilazione ed è implicata nelle interazioni ospite-virus e nell'invecchiamento cellulare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 73–272) mira alla regione centrale/C-terminale della PHB umana; verificare l'omologia di sequenza se si lavora con altre specie.
• Per il Western blot, prevedere una banda a ~30 kDa in condizioni riducenti standard; convalidare con controlli positivi (es. HeLa, HepG2) e considerare i controlli di carico.
• Per IHC-P, il recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6,0) potrebbe essere necessario; ottimizzare la diluzione dell'anticorpo e il sistema di rilevamento per il tipo di tessuto.
• Per IF/ICC, ottimizzare la fissazione/permeabilizzazione per preservare gli epitopi mitocondriali e nucleari; si consiglia la colorazione simultanea con marcatori di organelli.
• Come anticorpo policlonale, valutare la coerenza lotto-per-lotto per gli assay quantitativi; considerare esperimenti pilota per la riproducibilità.

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