Anticorpo policlonale anti-PRP19 per WB - Q9UMS4

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PRP19

• PRP19 (Pre-mRNA-processing factor 19, noto anche come PSO4, SNEV, hPso4, NMP200 e UBOX4) è una ubiquitina-proteina ligasi e un componente essenziale dello spliceosoma richiesto per lo splicing del pre-mRNA. Riferimenti correlati: PMID:28076346, PMID:28502770, PMID:29301961
• Come parte del complesso PRP19C/Prp19, media la poliubiquitinazione legata alla Lys-63 della proteina spliceosomiale U4 PRPF3, facilitando il riconoscimento da parte del componente U5 PRPF8 e stabilizzando il complesso tri-snRNP U4/U5/U6. Riferimenti correlati: PMID:20595234
• PRP19 viene reclutato sul dominio C-terminale della RNA polimerasi II e sul pre-mRNA, accoppiando la trascrizione con il macchinario di splicing. Riferimenti correlati: PMID:21536736
• Il complesso XAB2, che include PRP19, partecipa anche allo splicing del pre-mRNA, alla trascrizione e alla riparazione accoppiata alla trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:17981804
• Nella risposta al danno al DNA, PRP19 viene reclutato dal complesso RPA nei siti di danno, dove ubiquitina direttamente RPA1 e RPA2 con catene legate alla Lys-63, promuovendo il reclutamento del complesso ATR-ATRIP e l'attivazione di ATR. Riferimenti correlati: PMID:24332808
• Svolge un ruolo nella riparazione delle rotture del doppio filamento del DNA reclutando SETMAR sul DNA danneggiato e può anche partecipare alla riparazione dei crosslink interfilamento del DNA. Riferimenti correlati: PMID:18263876, PMID:16223718
• PRP19 può anche mediare la poliubiquitinazione legata alla Lys-48, indirizzando i substrati verso la degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:11435423
• La localizzazione subcellulare include nucleo, nucleoplasma, citoplasma, citoscheletro (fuso) e goccioline lipidiche; è espressa ubiquitariamente, ma debolmente nelle cellule senescenti e altamente nelle linee cellulari tumorali.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione interna (amminoacidi 127-416), consentendo il rilevamento della PRP19 a lunghezza intera e potenzialmente delle isoforme rilevanti.
• Per il western blot (WB), è attesa una banda predominante a circa 55 kDa; validare il segnale nel sistema di campioni pertinente, poiché i livelli di espressione variano con la senescenza cellulare e lo stato tumorale.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare l'ottimizzazione del recupero dell'antigene e controlli appropriati per tenere conto della distribuzione nucleare e citosolica della proteina.
• La reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto lo rende adatto a studi comparativi; tuttavia, verificare la reattività nel proprio modello sperimentale.
• Dati i ruoli di PRP19 nei percorsi dello spliceosoma e della riparazione del DNA, questo anticorpo può essere utilizzato per indagare le interazioni proteiche e la formazione di complessi tramite immunoprecipitazione (IP).
• Per le applicazioni ELISA, determinare empiricamente la concentrazione di rivestimento ottimale.

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