Anticorpo monoclonale rabbit Anti-PRP19 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9UMS4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PRP19

• PRPF19 (fattore di lavorazione del pre-mRNA 19, noto anche come PRP19, SNEV, PSO4, NMP200, hPSO4) è una proteina di 55 kDa che agisce come ubiquitina-protein ligasi e componente centrale di numerosi complessi coinvolti nello splicing dell'mRNA e nella riparazione del DNA.
• È essenziale per lo splicing del pre-mRNA come componente dello spliceosoma (PubMed:28076346, PubMed:28502770, PubMed:29301961), e all'interno del complesso PRP19C/NTC catalizza la poliubiquitinazione legata a Lys-63 della proteina PRPF3 della U4 snRNP, per stabilizzare il tri-snRNP U4/U5/U6 (PubMed:20595234).
  Riferimenti correlati: PMID:28076346, PMID:28502770, PMID:29301961, PMID:20595234
• Nella risposta al danno del DNA, PRPF19 viene reclutato nei siti di danno da RPA e ubiquitina direttamente RPA1 e RPA2, permettendo l'attivazione di ATR-ATRIP (PubMed:24332808). Partecipa anche alla riparazione delle rotture doppie del filamento di DNA tramite il reclutamento di SETMAR (PubMed:18263876) e alla riparazione dei legami intrecciati tra filamenti (PubMed:16223718).
  Riferimenti correlati: PMID:24332808, PMID:18263876, PMID:16223718
• PRPF19 si localizza principalmente nel nucleo e nel nucleoplasma, ma è presente anche nel fuso mitotico, nel citoplasma e nelle gocce lipidiche, a conferma dei suoi molteplici ruoli.
• È espresso ubiquitinariamente nei tessuti umani, con un'espressione notevolmente più bassa nelle cellule senescenti e livelli più elevati nelle linee cellulari tumorali, il che suggerisce un suo ruolo nella proliferazione cellulare e nel cancro.
• La proteina contiene ripetizioni WD e un dominio U-box, che la classificano come ubiquitina transferasi E3 di tipo RING; subisce acetilazione ed essa stessa è soggetta a ubiquitinazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 400-504 vicino all'estremità C-terminale; verificare la conservazione di questo epitopo in PRPF19 di topo e ratto (UniProt Q9UMS4, Q8BND5, Q5XI47) per anticipare eventuali differenze di reattività specifiche per specie.
• Per Western blot, il peso molecolare atteso è 55 kDa; tenere conto che le modifiche post-traduzionali o le varianti di splicing possono produrre bande aggiuntive; includere marcatori di peso molecolare e controlli di caricamento appropriati.
• Nell'immunoprecipitazione e nell'IF/ICC, valutare i pattern di colorazione nucleare e citoplasmatica; si raccomanda una fissazione e una permeabilizzazione leggere per preservare il riconoscimento dell'epitopo.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rivelazione; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale diretto contro un epitopo non sovrapposto può migliorare la specificità del test.
• Trattandosi di un anticorpo monoclonale rabbit, è previsto che abbia alta affinità e bassa variabilità lotto per lotto; tuttavia, validare ogni nuovo lotto nel vostro specifico sistema di analisi.

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