Anticorpo policlonale coniglio Anti-PRP31 per WB, IHC-P, ELISA - Q8WWY3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PRPF31

• PRPF31, noto anche come ribonucleoproteina nucleare piccola U4/U6 Prp31, è una proteina legante l'RNA di 55 kDa che condivide un'alta omologia tra umano, topo e ratto.
• È un componente centrale dello spliceosoma ed essenziale per lo splicing del pre-mRNA (PubMed:11867543, PubMed:20118938, PubMed:28781166).
  Riferimenti correlati: PMID:11867543, PMID:20118938, PMID:28781166
• PRPF31 è richiesto per l'assemblaggio del complesso tri-snRNP U4/U5/U6, un passaggio critico nella formazione dello spliceosoma (PubMed:11867543).
  Riferimenti correlati: PMID:11867543
• Si localizza prevalentemente nel nucleo, con arricchimento negli speckles nucleari e nei corpi di Cajal, compartimenti specializzati per la maturazione e il processing dell'mRNA.
• È espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, coerentemente con il suo ruolo fondamentale nello splicing costitutivo.
• Modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione sono state identificate tramite spettrometria di massa, potenzialmente regolando la sua attività.
• Mutazioni genetiche in PRPF31 sono collegate alla retinite pigmentosa autosomica dominante, rendendolo un bersaglio clinicamente rilevante per la ricerca sulle malattie retiniche ereditarie.
• Contiene domini a elica ripiegata (coiled-coil) caratteristici e un motivo di riconoscimento dell'RNA, tipici delle proteine spliceosomiali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–200) di PRPF31 umano; questa sequenza è conservata tra le specie, il che potrebbe spiegare la reattività crociata dell'anticorpo con gli ortologhi di topo e ratto.
• Nel Western blot (WB), ci si aspetta una banda predominante vicino a 55 kDa; bande aggiuntive possono derivare da varianti di splicing o modificazioni post-traduzionali. Convalidare con lisati di controllo positivo (es. HeLa, HEK293) e considerare i controlli di carico.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si raccomanda il recupero dell'antigene (indotto dal calore con tampone citrato pH 6.0 o Tris-EDTA pH 9.0); testare su sezioni incluse in paraffina di tessuti con alta espressione di PRPF31, come tonsilla o testicolo.
• Le applicazioni ELISA possono essere ottimizzate con formati diretti o di cattura; le diluizioni iniziali tipiche variano da 1:500 a 1:2000, ma la titolazione è essenziale.
• L'anticorpo è adatto per rilevare PRPF31 endogeno in modelli umani, murini e di ratto, ma i ricercatori dovrebbero confermare la specificità tramite validazione di knockdown/knockout nei loro sistemi.

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