Anticorpo policlonale Anti-PRSS1 per WB, IHC-P, ELISA - P07477

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di PRSS1

• PRSS1 codifica per la serina proteasi 1, un membro della famiglia delle tripsine di enzimi digestivi, anche noto come tripsinogeno cationico, tripsina-1 o tripsina anionica I.
• La proteina viene secreta come zimogeno inattivo (tripsinogeno) e viene attivato dall'enteropeptidasi nell'intestino tenue, dove scinde i legami peptidici sul lato carbossilico degli amminoacidi basici come l'arginina e la lisina.
• Gli studi funzionali hanno dimostrato attività contro i substrati sintetici Boc-Phe-Ser-Arg-Mec, Boc-Leu-Thr-Arg-Mec, Boc-Gln-Ala-Arg-Mec e Boc-Val-Pro-Arg-Mec, con la forma a catena singola più attiva rispetto alla forma a due catene.
• Come indicato dagli studi strutturali, contiene legami disolfuro e lega il calcio, che stabilizza l'enzima e previene l'autolisi.
• La localizzazione subcellulare è principalmente extracellulare: viene secreta nel lume intestinale e nello spazio extracellulare per svolgere la sua funzione proteolitica nella digestione.
• La proteina è classificata con parole chiave come secreta, serina proteasi, zimogeno, legame disolfuro, calcio, legame metallico, digestione e idrolasi.
• PRSS1 è distinto da altre isoforme della tripsina (ad esempio PRSS2, PRSS3) ma condivide una significativa omologia di sequenza; è espresso prevalentemente nel pancreas ed è un componente del proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 24–247 di PRSS1 umano (regione della tripsina matura), quindi l'anticorpo può riconoscere sia la forma proenzimatica (tripsinogeno) che quella attiva della tripsina; tieni conto di questo aspetto nella progettazione di studi sullo stato di attivazione.
• Per Western blot (WB), la dimensione prevista della banda è di circa 24 kDa; osserva comunque che modifiche post-traduzionali (ad esempio solfatazione) o il processamento dello zimogeno possono causare leggere deviazioni.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), ricorda che PRSS1 è molto abbondante nel pancreas; convalida l'anticorpo in appropriati controlli positivi (ad esempio pancreas) e negativi (ad esempio tessuti non secretori) per valutare la specificità.
• La reattività incrociata è riportata per uomo e ratto; per esperimenti che coinvolgono topo o altre specie, verifica la reattività in modo indipendente a causa di potenziali differenze di sequenza tra le isoforme della tripsina.
• Per applicazioni ELISA, la natura policlonale dell'anticorpo permette la cattura o la rilevazione di PRSS1 in fluidi biologici come siero o succo pancreatico; considera comunque l'ottimizzazione della diluizione e l'interferenza di altre proteasi di tipo tripsina.
• Dato l'elevata similarità di sequenza all'interno della famiglia delle tripsine, valuta la possibile reattività incrociata con PRSS2 o PRSS3 se lavori con campioni in cui possono essere presenti più isoforme.

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