Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-PSD95 per WB, ELISA - P78352

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PSD95

• L'omologo 4 della proteina discs large (DLG4), noto anche come proteina della densità postsinaptica 95 (PSD-95) o proteina associata alla sinapsi 90 (SAP90), è un membro della famiglia delle guanilato chinasi associate alla membrana (MAGUK). Funge da proteina di scaffolding postsinaptica critica.
• La PSD95 raggruppa i recettori NMDA e i canali del potassio di tipo shaker sulla membrana postsinaptica, organizzando la densità postsinaptica (PSD) e regolando la forza sinaptica.
• È necessaria per la plasticità sinaptica associata alla segnalazione dei recettori NMDA; la sovraespressione o la deplezione di DLG4 altera il rapporto tra sinapsi eccitatorie e inibitorie nei neuroni dell'ippocampo.
• La PSD95 immobilizza i recettori glutammatergici di tipo AMPA (AMPAR) nella PSD, mantenendoli in uno stato attivo e prevenendo la depressione sinaptica.
• In condizioni basali, la PSD95 collabora con FYN per stabilizzare la palmitoiltransferasi ZDHHC5 sulla membrana sinaptica, inibendone l'endocitosi. Riferimenti correlati: PMID:26334723
• La PSD95 è espressa prevalentemente nel cervello e si localizza sulla membrana cellulare, nella densità postsinaptica, nelle spine dendritiche e nei compartimenti presinaptici.
• Le modifiche post-traduzionali includono la palmitoilazione, che la ancorano alla membrana, e la fosforilazione. Lo splicing alternativo genera più isoforme e le mutazioni sono associate a disabilità intellettiva.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 1-100 della PSD95 umana, che bersaglia la regione N-terminale. Verificare che la preparazione del campione preservi questo epitopo.
• Per il Western blotting, la PSD95 migra a circa 80 kDa. Utilizzare una percentuale di gel appropriata (ad esempio, 8–10%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine ad alto peso molecolare.
• Le diluizioni iniziali consigliate per la WB possono variare da 1:500 a 1:2000, ma è necessaria un'ottimizzazione individuale in base al tipo di campione e al sistema di rilevamento.
• L'anticorpo presenta reazione crociata con topo e ratto, quindi è adatto per lisati di cervello di roditore e sezioni di tessuto; validarlo nel vostro specifico sistema modello.
• Per l'ELISA, rivestire il peptide di immunizzazione o la proteina ricombinante a 1–10 µg/mL e titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.

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