Anticorpo policlonale di coniglio anti-PSIP1 per WB, ELISA - O75475

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PSIP1

• PSIP1, noto anche come LEDGF, DFS70, p75/p52 e PAIP, è un coattivatore trascrizionale che svolge un ruolo fondamentale nella differenziazione delle cellule staminali neuroepiteliali e nella neurogenesi, in particolare nella regolazione genica delle cellule epiteliali del cristallino e nelle risposte allo stress.
• La proteina esiste sotto forma di molteplici isoforme; l'isoforma 2 (p75) agisce come coattivatore trascrizionale più generale e potente e può inoltre funzionare da adattatore per coordinare lo splicing del pre-mRNA, mentre l'isoforma 1 (p52) è meno caratterizzata.
• PSIP1 agisce come cofattore cellulare per l'integrazione lentivirale, ancorando i complessi di pre-integrazione alla cromatina dell'ospite tramite il suo dominio di legame all'integrasi, una funzione fondamentale per la replicazione dell'HIV-1.
• La localizzazione subcellulare è esclusivamente nucleare, in linea con i suoi ruoli nella trascrizione, nello splicing e nell'integrazione virale.
• La proteina è ampiamente espressa, con i livelli più elevati nel timo e un'espressione marcata nel cervello fetale e adulto, inclusi la zona subventricolare, l'ippocampo e il neuroepitelio germinativo; l'espressione è nettamente maggiore nel cervello fetale rispetto a quello adulto.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, citrullinazione e coniugazione con ubiquitina, che possono regolarne l'attività e le interazioni.
• Ulteriori caratteristiche strutturali includono un dominio coiled-coil e una regione di legame al DNA, che facilitano l'associazione con la cromatina e la regolazione trascrizionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato generato utilizzando un immunogeno proteico ricombinante comprendente gli amminoacidi 301-530 di PSIP1 umano, corrispondente alla regione C-terminale che include il dominio di legame all'integrasi e parte del dominio coiled-coil; si prevede che riconosca entrambe le principali isoforme (p75 e p52).
• Per il Western blot (WB), si consiglia di utilizzare estratti nucleari da linee cellulari pertinenti, come HeLa o precursori neuronali, tenendo presente la banda prevista intorno a 60 kDa; a causa della variazione delle isoforme e delle modifiche post-traduzionali, possono essere osservate più bande.
• La reattività crociata con topo e ratto rende questo anticorpo adatto a studi comparativi in modelli di roditori, ma è necessario validarlo nel sistema campione pertinente per confermarne la specificità.
• Per l'ELISA, si può considerare l'utilizzo di proteine ricombinanti o antigeni peptidici per valutare l'affinità di legame; l'ELISA diretto può essere utilizzato per la determinazione del titolo, mentre l'ELISA a sandwich può richiedere anticorpi appaiati.

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