Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PSMA4 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P25789

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PSMA4

• PSMA4 codifica per la subunità alfa tipo-4 del proteasoma, un componente core del proteasoma 20S, anche designata come subunità C9, subunità L del proteasoma o alfa-3.
• Come parte della particella core 20S, PSMA4 contribuisce alla struttura a forma di barile che degrada proteoliticamente la maggior parte delle proteine intracellulari in modo ATP/ubiquitina-dipendente tramite il proteasoma 26S (20S + particelle regolatorie 19S) e media anche la degradazione indipendente dall'ubiquitina tramite associazione con regolatori PA200 o PA28.
• Le vie di degradazione indipendenti dall'ubiquitina che coinvolgono PSMA4 sono cruciali per la spermatogenesi (complesso 20S-PA200) e la generazione di peptidi antigenici presentati da MHC di classe I (complesso 20S-PA28), evidenziando il suo ruolo sia nella biologia riproduttiva che nell'immunità adattativa.
• PSMA4 si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel nucleo, in linea con l'ampia distribuzione intracellulare del sistema proteasomico per il controllo di qualità delle proteine e la proteolisi regolata.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono modulare l'attività o l'assemblaggio del proteasoma, ed è soggetta a splicing alternativo, potenzialmente generando isoforme con funzioni distinte.
• La presenza della parola chiave interazione ospite-virus suggerisce che PSMA4 e il proteasoma possano essere sfruttati da patogeni virali, un'area di indagine attiva nella biologia delle infezioni.
• Le subunità alfa del proteasoma, inclusa PSMA4, formano gli anelli esterni del core 20S e controllano l'ingresso dei substrati, con ruoli specifici nel riconoscimento e nello svolgimento dei substrati prima della degradazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro la proteina ricombinante a lunghezza intera di PSMA4 umano, che condivide un'elevata omologia di sequenza con gli ortotopi di topo e ratto; pertanto, ci si aspetta che riconosca PSMA4 di queste specie, ma si raccomanda la verifica nel tipo di campione specifico.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è ~29 kDa; tuttavia, a causa di potenziali modificazioni post-traduzionali, la migrazione effettiva della banda può variare; assicurarsi condizioni appropriate di percentuale di gel e trasferimento.
• Nell'immunoprecipitazione, la natura policlonale può catturare la PSMA4 nativa e potenzialmente i complessi proteasomici associati; considerare protocolli di cross-linking se si vogliono preservare le interazioni proteiche.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, PSMA4 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo; i metodi di permeabilizzazione e fissazione possono influenzare i pattern di colorazione; includere controlli appropriati.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'uso di una coppia di anticorpi abbinati per saggi sandwich; validare con curve standard di PSMA4 ricombinante.
• Poiché PSMA4 è una proteina housekeeping abbondante, i controlli di caricamento come beta-actina o GAPDH potrebbero non riflettere una normalizzazione accurata; considerare la colorazione della proteina totale o controlli specifici per il proteasoma.

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