Anticorpo policlonale anti-PSMA/FOLH1 per WB ed ELISA - Q04609

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PSMA/FOLH1

• PSMA/FOLH1 (glutammato carbossipeptidasi 2) è una metalloenzima multifunzionale a base di zinco codificata dal gene FOLH1, nota anche come GCPII, NAALADasi I o folato idrolasi 1. Esistono molteplici isoforme, con PSMA' predominante nella prostata normale e PSMA-1/PSMA-9 associate ai tumori prostatici.
• Possiede una doppia attività enzimatica: folato idrolasi (scissione del folilpoli-γ-glutammato) e NAALADasi (idrolisi dell'N-acetilaspartilglutammato, NAAG). Nell'intestino facilita l'assorbimento del folato alimentare; nel cervello regola la neurotrasmissione glutammatergica degradando il NAAG e liberando glutammato.
• Svolge un ruolo ben documentato nella progressione dei tumori prostatici; è costantemente altamente espressa nell'epitelio prostatico e significativamente sovraregolata nei tumori prostatici primari e metastatici.
• La localizzazione subcellulare è principalmente a livello della membrana cellulare, come glicoproteina transmembrana di tipo II dotata di una coda citoplasmatica, ma può essere rilevata anche nel citoplasma.
• La distribuzione tissutale è ampia: è altamente espressa nella prostata, nel cervello (striato ventrale, tronco encefalico), nei reni, nel fegato e nell'intestino tenue (orletto a spazzola digiunale). Livelli inferiori sono presenti nella vescica urinaria, nei testicoli, nelle ovaie e in altri organi. L'espressione delle isoforme varia tra i tessuti normali e quelli maligni.
• Le modifiche post-traduzionali includono N-glicosilazione e fosforilazione; l'enzima richiede due ioni zinco e calcio per l'attività catalitica e la stabilità strutturale.
• In vitro, presenta un'ulteriore attività di tipo dipeptidil-peptidasi IV, scindendo substrati come Gly-Pro-AMC, a indicare la sua versatilità nell'idrolisi dei legami peptidici.
• È classificata da UniProt come enzima multifunzionale, metalloproteasi e carbossipeptidasi; è soggetta a splicing alternativo, che dà origine a isoforme funzionalmente distinte.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico situato all'interno degli amminoacidi 50–150 del dominio extracellulare della PSMA/FOLH1 umana. Questa regione è conservata nell'uomo, nel topo e nel ratto, a supporto della reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, è prevista una banda vicina a 84 kDa nelle linee cellulari di cancro della prostata umano (ad es., LNCaP, PC-3) o negli omogenati di tessuto prostatico. Verificare la specificità includendo controlli appropriati e considerare il recupero antigenico se si utilizzano sezioni incluse in paraffina per IHC (non validato in questo caso).
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione. L'abbinamento con un anticorpo monoclonale diretto contro un epitopo non sovrapposto potrebbe migliorare la sensibilità nei test sandwich. La reattività crociata con campioni di roditori dovrebbe essere valutata empiricamente.
• Poiché gli anticorpi policlonali riconoscono epitopi multipli, la coerenza tra i diversi lotti dovrebbe essere monitorata nei test quantitativi. Si raccomandano esperimenti pilota con uno standard di riferimento prima di studi su larga scala.

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