Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-PSMA/FOLH1 per WB, IF-P, ELISA - Q04609

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PSMA/FOLH1

• PSMA/FOLH1, noto anche come glutammato carbossipeptidasi 2, folato idrolasi 1 e NAALADasi I, è una metalloproteasi zinco-dipendente multifunzionale codificata dal gene FOLH1. Presenta sia attività di folato idrolasi che di N-acetil-alfa-linked-acido dipeptidasi (NAALADasi).
• L'enzima idrolizza preferenzialmente i tri-alfa-glutammato peptidi. Nell'intestino è essenziale per l'assorbimento del folato alimentare; nel cervello modula la neurotrasmissione eccitatoria idrolizzando il neuropeptide NAAG per rilasciare glutammato.
• PSMA/FOLH1 possiede anche attività di tipo dipeptidil-peptidasi IV, poiché cliva Gly-Pro-AMC in vitro.
• La proteina è una proteina di membrana di tipo II a passaggio singolo, localizzata prevalentemente sulla membrana cellulare, ma è rilevabile anche nel citoplasma.
• FOLH1 è altamente espresso nell'epitelio prostatico e rilevabile in un'ampia gamma di tessuti tra cui vescica urinaria, rene, testicolo, ovaio, tuba di Falloppio, mammella, ghiandola surrenale, fegato, esofago, stomaco, intestino tenue, colon e cervello. È espresso anche nell'endotelio capillare di diversi tumori.
• Nel cancro prostatico sono espresse isoforme distinte: l'isoforma PSMA-1 è più abbondante nei tumori primari, l'isoforma PSMA-9 è espressa specificamente nel cancro prostatico, mentre l'isoforma PSMA' predomina nella prostata normale.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione e fosforilazione, e richiede ioni zinco e calcio per la sua attività catalitica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che comprende il dominio citoplasmatico N-terminale (amminoacidi 1–106) di PSMA/FOLH1 umano. Questa regione è relativamente conservata; tuttavia, è riportata reattività incrociata con il ratto, quindi si raccomanda la validazione nella specie di interesse.
• Per Western blot è attesa una banda intorno a 84 kDa. Data la natura di glicoproteina, la banda osservata può apparire leggermente più grande o più ampia. La diluizione ottimale di bloccaggio e dell'anticorpo deve essere determinata empiricamente.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), si consiglia l'uso della permeabilizzazione per consentire l'accesso all'epitopo intracellulare. La co-colorazione con un marcatore di membrana plasmatica può aiutare a confermare la localizzazione.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per catturare o rilevare PSMA/FOLH1 umano in campioni come lisati cellulari o estratti tissutali, ma la compatibilità della coppia sandwich deve essere verificata.

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