Anticorpo monoclonale coniglio anti-PSMB10 per WB, ELISA - P40306

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PSMB10

• PSMB10 codifica per la subunità beta tipo 10 del proteasoma, nota anche come LMP10, MECL1 o beta-2i, una subunità catalitica dell'immunoproteasoma 20S.
• Come componente dell'immunoproteasoma, è specializzato nella generazione di ligandi peptidici per le molecole MHC di classe I, svolgendo un ruolo centrale nella processazione antigenica.
• Il proteasoma cliva i peptidi dopo i residui Arg, Phe, Tyr, Leu e Glu a pH da neutro a leggermente basico, con attività proteolitica dipendente da ATP.
• Subcellularmente, PSMB10 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con la distribuzione del proteasoma.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione (confermato dall'identificazione proteomica).
• L'alias PRAAS5 collega PSMB10 alle sindromi autoinfiammatorie associate al proteasoma; sono state riportate varianti associate alla malattia.
• PSMB10 è espressa come precursore zimogeno che subisce una processazione autocatalitica per formare la proteasi treonina matura.
• Le parole chiave evidenziano il suo coinvolgimento nelle interazioni ospite-virus e la disponibilità di dati strutturali 3D.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, utilizzare condizioni riducenti e validare con lisati positivi di cellule umane, di topo o ratto; la dimensione prevista della banda è ~29 kDa (UniProt: 28936 Da).
• La PSMB10 endogena può mostrare un'espressione variabile tra i diversi tipi cellulari; si consiglia di utilizzare campioni stimolati con interferone-gamma per sovraregolare le subunità dell'immunoproteasoma.
• Per l'ELISA, ottimizzare il buffer di coating e la diluizione dell'anticorpo; l'anticorpo può riconoscere sia le forme native che denaturate sulla base dell'immunogeno ricombinante a lunghezza intera.
• Eseguire l'allineamento della sequenza di PSMB10 di uomo, topo e ratto per confermare la conservazione dell'epitopo se sono necessari dati di reattività incrociata tra specie oltre al western blot.

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