Anti-PSMB8 Coniglio Anticorpo Policlonale per WB, IF/ICC, ELISA - P28062

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PSMB8

• PSMB8 (Sottounità beta del proteasoma tipo-8), noto anche come LMP7, PSMB5i e RING10, è una sottounità catalitica dell'immunoproteasoma, una forma specializzata del proteasoma 26S.
• Sostituisce la sottounità costitutiva PSMB5 nell'immunoproteasoma, migliorando la capacità di clivare i peptidi dopo residui idrofobi e basici, promuovendo così la generazione di peptidici leganti il MHC di classe I per la presentazione degli antigeni.
• PSMB8 svolge un ruolo critico nella generazione di peptidi antigenici giuntati, prodotti dalla legazione di due prodotti di clivaggio separati, un processo essenziale per espandere la diversità degli antigeni presentati (PubMed:27049119). Riferimenti correlati: PMID:27049119
• La proteina è coinvolta nell'apoptosi mediando la degradazione della proteina anti-apoptotica MCL1, e funge da componente principale della sensibilità indotta dall'interferone gamma.
• PSMB8 è anche implicato nelle vie di risposta infiammatoria ed è richiesto per la differenziazione dei preadipociti in adipociti, collegando l'immunoproteasoma alla regolazione metabolica.
• A livello subcellulare, PSMB8 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con la distribuzione del proteasoma.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (come annotato nelle parole chiave UniProt) e la proteina subisce splicing alternativo, producendo isoforme con funzioni distinte (es. isoforme E1 ed E2 nelle cellule cancerogene).

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 163-272 di PSMB8 umano, corrispondente alla regione C-terminale. Questo design può migliorare la specificità per il rilevamento del PSMB8 endogeno attraverso le specie.
• Per il Western blotting, è prevista una banda a circa 30 kDa. Validare utilizzando controlli positivi e negativi appropriati nel sistema di campionamento.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, prevedere una colorazione citoplasmatica e nucleare. Ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per ottenere il miglior segnale.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale di cattura per lo sviluppo di ELISA a sandwich; validare con PSMB8 ricombinante o lisati cellulari.
• Dato che l'espressione di PSMB8 può essere indotta dall'interferone gamma, potrebbe essere necessario stimolare le cellule per raggiungere livelli rilevabili in alcuni tipi cellulari.

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