Anticorpo policlonale di coniglio anti-PSMD4 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P55036

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PSMD4

• PSMD4, noto anche come RPN10, S5A, AF, ASF e fattore antisezcretorio 1, è la subunità regolatoria 4 non-ATPasi del proteasoma 26S, codificata dal gene PSMD4 (GeneID: 5710).
• Agisce come subunità recettoriale dell'ubiquitina, essenziale per la degradazione ATP-dipendente delle proteine ubiquitinate, riconoscendo e legando le catene di poliubiquitina per indirizzare i substrati alla degradazione proteasomica.
• Facilitando la rimozione delle proteine mal ripiegate, danneggiate o non necessarie, PSMD4 svolge un ruolo centrale nell'omeostasi proteica e partecipa a processi cellulari fondamentali, tra cui la progressione del ciclo cellulare, l'apoptosi e la riparazione dei danni al DNA.
• PSMD4 mostra una marcata preferenza per le catene di poliubiquitina più lunghe, aumentando l'efficienza e la selettività della via ubiquitina-proteasoma.
• Le modificazioni post-traduzionali, come la fosforilazione, regolano la funzione di PSMD4, mentre lo splicing alternativo produce molteplici isoforme con ruoli potenzialmente distinti.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blot (WB), l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA, l'immunogeno copre la lunghezza completa di PSMD4 (amminoacidi 1-377); si consiglia di utilizzare controlli positivi provenienti da linee cellulari umane o di ratto note per esprimere PSMD4.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), è necessario ottimizzare metodi appropriati di fissazione e permeabilizzazione, poiché PSMD4 può localizzarsi sia nei compartimenti citoplasmatici sia in quelli nucleari, a seconda del tipo cellulare e delle condizioni.
• Quando si progettano esperimenti di co-IP, si tenga presente che Rpn10/PSMD4 interagisce transitoriamente con il coperchio del proteasoma; includere tamponi di eluizione appropriati e confermare l'integrità del complesso con anticorpi contro le subunità del proteasoma.
• I fattori di diluizione devono essere determinati empiricamente; si raccomandano esperimenti preliminari nel sistema di rilevamento pertinente per stabilire le concentrazioni di lavoro ottimali per ciascuna applicazione.

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