Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-PTBP2 per WB, IP, IF e IHC - Q9UKA9

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del PTBP2

• PTBP2 (proteina legante il tratto polipirimidinico 2) è una proteina legante l'RNA nota anche come PTB neurale (nPTB), proteina simile al PTB (PTBLP) o brPTB. Appartiene alla famiglia hnRNP ed è l'omologo arricchito a livello neurale dell'onnipresente PTBP1.
• Si lega a tratti polipirimidinici intronici e media la regolazione negativa dello splicing degli esoni. Nei tessuti neuronali, può antagonizzare l'attivatore di splicing NOVA1 per perfezionare la selezione alternativa degli esoni.
• Svolge ruoli aggiuntivi nella regolazione della traduzione, collegando il controllo post-trascrizionale ai risultati dell'espressione genica.
• Si localizza prevalentemente nel nucleo, coerentemente con il suo ruolo principale nell'elaborazione del pre-mRNA.
• PTBP2 subisce diverse modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono modulare la sua attività, la dinamica subcellulare o le interazioni proteiche.
• La proteina è espressa principalmente nel cervello, ma viene rilevata anche nel cuore e nel muscolo scheletrico. Esistono multiple isoforme: le isoforme 1 e 2 sono specifiche neuronali, le isoforme 3 e 4 sono presenti in tessuti non neuronali, e le isoforme 5 e 6 sono forme troncate in cellule non neuronali.
• Esibisce un'affinità intrinseca di legame all'RNA ridotta rispetto a PTBP1, una proprietà che può influenzare i suoi ruoli regolatori in diversi contesti cellulari.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno è un peptide N-terminale (aa 1–100) del PTBP2 umano, una regione altamente conservata tra umano, mouse e ratto. Questa conservazione è probabilmente alla base della reattività incrociata riportata.
• Per l'analisi Western blot, si prevede una banda predominante vicino a 57 kDa corrispondente al PTBP2 a lunghezza intera. Bande aggiuntive possono derivare da isoforme alternative o modificazioni post-traduzionali; verificare la specificità utilizzando controlli appropriati.
• Nell'immunoprecipitazione, considerare il cross-linking covalente dell'anticorpo alle perle di proteina A/G per minimizzare la co-eluizione delle catene pesanti/leggere se queste interferiscono con il rilevamento a valle.
• Per immunofluorescenza (IF/ICC) e immunochimica (IHC-P), la localizzazione nucleare del PTBP2 deve essere confermata. Ottimizzare la fissazione (es. 4% PFA per IF, sezioni in paraffina fissate in formalina per IHC) e la permeabilizzazione (es. 0,1–0,2% Triton X-100) per ottenere un adeguato recupero dell'epitopo e chiarezza del segnale.
• Dato che l'espressione di PTBP2 è più alta nei tessuti neuronali, utilizzare tessuto cerebrale o linee cellulari neuronali come controlli positivi; le cellule non neuronali possono esprimere livelli inferiori o isoforme distinte.
• Quando si utilizza l'ELISA, assicurarsi che l'antigene di rivestimento preservi la conformazione nativa della regione N-terminale per mantenere il legame dell'anticorpo.

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