Anticorpo monoclonale Anti-PTEN per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P60484

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PTEN

• PTEN (omologo della fosfatasi e tensina) è una fosfatasi proteica e lipidica a doppia specificità, che agisce come un soppressore tumorale critico. L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-403 dell'isoforma canonica (UniProt P60484).
• Come fosfatasi lipidica, PTEN defosforila il fosfatidilinositolo 3,4,5-trisfosfato (PtdIns(3,4,5)P3) per antagonizzare la via di segnalazione PI3K-AKT/PKB, modulando così la progressione del ciclo cellulare, la sopravvivenza e il metabolismo. Riferimenti correlati: PMID:31492966 PMID:37279284
• Funziona anche come fosfatasi proteica, defosforilando proteine fosforilate su tirosina, serina e treonina, influenzando diverse cascate di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• PTEN si localizza in molteplici compartimenti subcellulari, tra cui citoplasma, nucleo, corpi PML, spine dendritiche, densità postsinaptica, e può essere secreto, riflettendo i suoi ruoli multifaccettati.
• È espresso a livelli relativamente alti in tutti i tessuti adulti, inclusi cuore, cervello, placenta, polmone, fegato, muscolo, rene e pancreas.
• PTEN svolge un ruolo chiave nella migrazione cellulare defosforilando la chinasi di adesione focale e interagendo con i complessi DLC1/TNS3 per regolare l'attivazione di RHOA e RAC1 al bordo anteriore e posteriore delle cellule in migrazione. Riferimenti correlati: PMID:22279049 PMID:26166433
• Modificazioni post-traduzionali come la monoubiquitinazione influenzano la localizzazione subcellulare e la funzione apoptotica di PTEN; la PTEN monoubiquitinata nucleare mostra un maggiore potenziale apoptotico. Riferimenti correlati: PMID:10468583 PMID:18716620

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende quasi l'intera lunghezza di PTEN umano (aa 1-403), quindi si prevede che l'anticorpo riconosca la PTEN totale indipendentemente dallo stato di fosforilazione. Per il Western blot, considerare l'inclusione di inibitori delle fosfatasi nel tampone di lisi per preservare i pattern di fosforilazione endogena di PTEN.
• PTEN migra a circa 47 kDa su SDS-PAGE; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e includere controlli positivi/negativi adeguati (ad es., lisati di cellule knockout per PTEN) per confermare l'identità della banda.
• Per l'immunoprecipitazione, testare diversi rapporti anticorpo-lisato e condizioni di incubazione per ottimizzare l'efficienza di cattura. Le prestazioni dell'anticorpo in IP sono state dimostrate; tuttavia, i singoli sistemi sperimentali potrebbero richiedere ottimizzazione.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, PTEN mostra colorazione sia citoplasmatica che nucleare. I metodi di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare significativamente i pattern di localizzazione; convalidare la colorazione nella vostra linea cellulare con profili di espressione di PTEN noti e utilizzare controlli isotipo.

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