Anticorpo policlonale di coniglio anti-PTGFR per WB - P43088

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del PTGFR

• Il gene PTGFR codifica il recettore della prostaglandina F2-alfa (noto anche come recettore prostanoide FP), un recettore accoppiato alle proteine G che media le risposte cellulari alla PGF2-alfa.
• In seguito al legame con la PGF2-alfa, il recettore attiva un sistema di secondi messaggeri fosfatidilinositolo-calcio tramite le proteine G, innescando cascate di segnalazione a valle (per similarità).
• Le isoforme dalla 2 alla 7 derivano da splicing alternativo; sebbene non leghino autonomamente la PGF2-alfa, possono modulare la segnalazione formando complessi eteromerici varianti con l'isoforma 1.
• Si propone che un eterodimero tra l'isoforma 1 e l'isoforma 5 funzioni come recettore per le prostammidi, incluso l'analogo sintetico bimatoprost.
• Il recettore è localizzato nella membrana cellulare e contiene sette domini transmembrana, in linea con la sua classificazione come GPCR.
• Il profilo di espressione tissutale indica un'elevata specificità nell'occhio, dove il recettore è coinvolto in processi fisiologici quali la regolazione della pressione intraoculare.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali, tra cui glicosilazione e formazione di ponti disolfuro, tipiche dei recettori di membrana, ed è classificata con parole chiave quali splicing alternativo, glicoproteina e trasduttore.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato a partire da un peptide sintetico comprendente gli amminoacidi 50–150, corrispondente a una regione extracellulare/transmembrana del PTGFR umano; ciò può consentire il rilevamento di più isoforme.
• Per il Western blot, per l'isoforma 1 è prevista una banda intorno a 40 kDa; si consiglia di utilizzare estratti proteici arricchiti in membrane per migliorare il segnale.
• La reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto suggerisce la presenza di epitopi conservati; verificarne le prestazioni nei tessuti o nei modelli cellulari pertinenti, ad esempio in campioni di origine oculare.
• Nell'ELISA, il peptide immunogeno può essere utilizzato come controllo positivo per valutare il legame. Si noti che il rilevamento del recettore nativo glicosilato può richiedere condizioni di rivestimento ottimizzate.
• Data l'esistenza di varianti di splicing, confermare la specificità mediante esperimenti di knockdown con siRNA o di sovraespressione qualora sia necessaria la discriminazione tra isoforme.

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