Anticorpo Policlonale Anti-PTK2B da Coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q14289

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di PTK2B

• Tirosina chinasi non recettoriale che regola la riorganizzazione del citoscheletro di actina, la polarizzazione cellulare, la migrazione, l'adesione, la diffusione e il rimodellamento osseo.
• Svolge un ruolo nella regolazione della risposta immunitaria umorale, è richiesto per livelli normali di cellule B marginali nella milza e la migrazione delle cellule B spleniche, e contribuisce alla polarizzazione dei macrofagi e alle risposte delle cellule T.
• Funziona nella segnalazione a valle dei recettori dell'integrina e del collagene, recettori immunitari, recettori accoppiati a proteine G (GPCR) e recettori per citochine/chemochine/fattori di crescita, mediando le risposte allo stress cellulare.
• Forma complessi di segnalazione multisubunità con SRC e chinasi della famiglia SRC, portando alla fosforilazione di numerosi substrati e all'attivazione di vie di segnalazione tra cui le cascate PI3K/AKT1, NOS3 e MAPK (MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1, MAPK8/JNK1).
• Recluta l'ubiquitina ligasi MDM2 su P53/TP53 nel nucleo, regolando l'attività, l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomale di P53; fosforila inoltre i recettori NMDA e le subunità dei canali del potassio.
• Si localizza nel citoplasma, nella regione perinucleare, nella membrana cellulare, nelle adesioni focali, nel lamellipodio, nella corteccia cellulare e nel nucleo.
• È più abbondante nel cervello, con i livelli più alti nell'amigdala e nell'ippocampo; è espresso anche nella milza, nei linfociti e a livelli più bassi nel rene.
• L'effetto dello splicing alternativo produce molteplici isoforme; è classificato come fosfoproteina e transferasi.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 780–1009), il che implica il riconoscimento di una regione distale dal dominio chinasi; tenere conto di questo aspetto durante la mappatura dei siti di interazione o l'utilizzo di costrutti troncati.
• Per il Western blot, aspettarsi una banda a ~116 kDa; validare in lisati da cervello, milza o cellule T Jurkat, dove PTK2B è espressa endogenamente.
• Per IF/ICC, PTK2B si localizza spesso nelle regioni perinucleari e nelle adesioni focali; fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate per il tuo tipo cellulare per preservare queste strutture.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione diretta o come coppia di cattura/rilevazione se abbinato a un altro clone; titolare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo per ottenere un segnale ottimale.
• Quando si utilizzano campioni di topo o ratto, la reattività crociata è attesa ma deve essere verificata tramite Western blot o IF sul tessuto corrispondente, poiché la conservazione dell'epitopo può variare.

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