Anticorpo Policlonale Anti-PTK6 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13882

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PTK6

• PTK6 (Protein-tirosin chinasi 6), nota anche come chinasi del tumore mammario (BRK), è una tirosin-proteina chinasi non recettoriale di 52 kDa codificata dal gene PTK6 (Gene ID: 5753).
• Svolge un ruolo dipendente dal contesto nella regolazione della differenziazione e del mantenimento delle cellule epiteliali, promuovendo l'apoptosi nei tessuti normali mentre migliora proliferazione, sopravvivenza e migrazione in contesti tumorigenici.
• In seguito a stimolazione con EGF, PTK6 fosforila ARAP1, il che ritarda la down-regolazione di EGFR e sostiene la segnalazione (PubMed:20554524). Riferimenti correlati: PMID:20554524
• PTK6 interagisce con i membri della famiglia EGFR (EGFR, ERBB2, ERBB3) e attiva vie a valle tra cui AKT, PI3K e STAT3/STAT5B per guidare la segnalazione oncogenica.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo, la membrana cellulare e le ruffles, con PTK6 nucleare associata alla regolazione della crescita negli epiteli normali e PTK6 citoplasmatica all'attivazione oncogenica.
• È espressa prevalentemente nei tessuti epiteliali, con i livelli più alti nel colon, ed è sovraespressa in molti tumori, inclusi carcinomi della mammella, ovarico, del colon e della prostata; non si trova nel cuore, cervello, fegato o muscolo.
• Modificazioni post-traduzionali: classificata come una fosfoproteina (parole chiave UniProt), e regolata da interazioni intramolecolari ed eventi di fosforilazione che controllano la sua attività chinasica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 222–451, che includono parte del dominio chinasico; l'anticorpo può riconoscere sia le forme fosforilate che non fosforilate, ma la mascheramento dell'epitopo da parte di modificazioni post-traduzionali dovrebbe essere considerato in determinate condizioni di saggio.
• Per il Western blot, è attesa una banda a 52 kDa; utilizzare controlli positivi come lisati di cellule di carcinoma del colon umano (es. HT-29) o di cancro alla prostata (es. LNCaP). Convalidare la specificità con knockdown mediato da siRNA o linee cellulari knockout.
• Nell'immunofluorescenza, PTK6 può localizzarsi sia nei compartimenti citoplasmatici che nucleari; si raccomanda la permeabilizzazione con Triton X-100 0,1–0,5% e una fissazione accurata per evitare artefatti.
• Per l'ELISA, il frammento di immunogeno ricombinante può servire come antigene di rivestimento positivo; includere appropriati controlli negativi per valutare il fondo.
• La reattività incrociata con topo e ratto è prevista in base all'omologia di sequenza; tuttavia, verificare nella specie bersaglio utilizzando tessuti o lisati cellulari rilevanti.

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