Anticorpo policlonale coniglio anti-Pumilio 1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q14671

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Pumilio 1

• Pumilio omologo 1 (PUM1) è una proteina legante l'RNA specifica per la sequenza che agisce come un repressore post-trascrizionale legandosi all'3'-UTR degli mRNA target tramite l'elemento di risposta Pumilio (PRE) con sequenza consenso 5'-UGUANAUA-3'. Riferimenti correlati: PMID:18328718, PMID:21397187, PMID:21572425

• PUM1 media la repressione attraverso due meccanismi: il reclutamento diretto del complesso deadenilasi CCR4-POP2-NOT che porta all'inibizione della traduzione e alla degradazione dell'mRNA, e la promozione dell'accessibilità dei miRNA per la repressione indipendente dalla deadenilazione. Riferimenti correlati: PMID:22955276, PMID:18776931, PMID:20818387, PMID:20860814

• Seguendo la stimolazione dei fattori di crescita, PUM1 viene fosforilato e si lega all'3'-UTR dell'mRNA CDKN1B/p27, inducendo un cambiamento conformazionale che espone i siti di legame per miR-221 e miR-222, risultando in una soppressione efficiente di CDKN1B/p27 e in un rapido ingresso nel ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:20818387

• PUM1 reprime un programma di geni essenziali per la stabilità genomica, inclusi fattori mitotici, di riparazione del DNA e di replicazione del DNA; questa attività è antagonizzata dal lncRNA NORAD, che sequestra PUM1 nel citoplasma. Riferimenti correlati: PMID:26724866

• Nei neuroni, PUM1 regola i livelli di mRNA ATXN1 legandosi al suo 3'-UTR e down-regolando i trascritti indipendentemente dalla macchinaria dei miRNA, con implicazioni per l'ataxia spinocerebellare. Riferimenti correlati: PMID:25768905, PMID:29474920

• PUM1 si localizza nel citoplasma, nei corpi P (P-bodies) e nei granuli citoplasmatici, ed è ampiamente espresso nei tessuti inclusi cervello, cuore, rene, muscolo, intestino e stomaco, ma è assente da specifiche regioni cerebrali come il cervelletto, il corpo calloso e l'ippocampo.

• PUM1 svolge ruoli nel rilevamento virale citoplasmatico, nella spermatogenesi e nel rinnovo delle cellule staminali embrionali prendendo di mira gli mRNA per la regolazione post-trascrizionale, ed è associato a varianti di malattia legate all'epilessia, alla disabilità intellettuale e alla neurodegenerazione. Riferimenti correlati: PMID:25340845

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-130 di Pumilio 1 umano, prendendo di mira la regione N-terminale. Questa regione può essere conservata tra le specie, supportando la reattività crociata osservata con il topo.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di ~126 kDa. Utilizzare una percentuale di gel appropriata e condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare, e considerare passaggi di blocco e lavaggio estesi per ridurre il background.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, la localizzazione citoplasmatica e granulare di PUM1 deve essere valutata con appropriata fissazione e permeabilizzazione; validare il pattern di colorazione rispetto a marcatori noti dei corpi P o dei granuli di stress se necessario.
• Per le applicazioni ELISA, la proteina immunogenica ricombinante può servire come controllo positivo. Titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità da lotto a lotto; si consiglia di validare ogni nuovo lotto nel proprio sistema di saggio specifico.

CamelBio: Il tuo ponte di approvvigionamento unico

CamelBio si specializza nel fornire ai produttori di diagnostica, ai laboratori e agli istituti di ricerca un accesso completo a materie prime IVD, servizi tecnici e supporto consulenziale dal concetto alla clinica. Per gli studi su Pumilio 1 e sulle proteine leganti l'RNA, offriamo coppie di anticorpi validate, anticorpi monoclonali e policlonali ottimizzati, reagenti ausiliari in blocco e approvvigionamento per target rari per semplificare lo sviluppo del vostro saggio. Contattateci per esplorare come la nostra catena di approvvigionamento integrata possa accelerare il vostro progetto.