Anticorpo policlonale anti-PUS10 per WB ed ELISA - Q3MIT2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PUS10

• PUS10 (nota anche come DOBI, Hup10, CCDC139) è una proteina multifunzionale che agisce come sintasi della pseudouridina del tRNA nel citoplasma e partecipa al processamento dei pri-miRNA nel nucleo, con ruoli distinti a seconda della sua localizzazione subcellulare. Riferimenti correlati: PMID:31819270 PMID:33023933
• Nel citoplasma, PUS10 catalizza la conversione dell'uracile in pseudouridina alle posizioni 54 e 55 nel loop Ψ GC di un sottogruppo di tRNA, una modifica fondamentale per la struttura e la funzione del tRNA. Riferimenti correlati: PMID:30530625 PMID:31819270 PMID:33023933
• L'attività di pseudouridilazione di PUS10 è potenziata dalla presenza di 1-metiladenosina alle posizioni 53–61 del tRNA bersaglio, indicando un meccanismo regolatorio dipendente dal contesto. Riferimenti correlati: PMID:30530625
• Nel nucleo, PUS10 si lega ai microRNA primari (pri-miRNA) e ne promuove il processamento indipendentemente dalla sua attività di sintasi della pseudouridina, evidenziando un ruolo non catalitico nella biogenesi dei miRNA. Riferimenti correlati: PMID:31819270
• PUS10 modula l'apoptosi indotta da TRAIL/TNFSF10 attivando la procaspasi-8 e promuovendo la scissione di BID, ed è necessaria per la progressione attraverso la via intrinseca mitocondriale della morte cellulare. Riferimenti correlati: PMID:14527409 PMID:19712588
• A livello subcellulare, PUS10 si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nei mitocondri, in accordo con le sue molteplici funzioni nel processamento dell'RNA e nella segnalazione della morte cellulare.
• La proteina contiene domini coiled-coil ed è annotata con parole chiave tra cui attività isomerasica, legame ai metalli, zinco, fosfoproteina e processamento del tRNA, che riflettono le sue caratteristiche strutturali ed enzimatiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo (una proteina di fusione ricombinante comprendente gli amminoacidi 290–529) copre la regione C-terminale di PUS10, il che può essere utile per rilevare sia le forme a lunghezza intera sia quelle troncate. Si consiglia di verificare il rilevamento della propria isoforma bersaglio nel sistema campione pertinente.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 60 kDa, ma le modifiche post-traduzionali o il processamento subcellulare possono causare lievi variazioni nella posizione delle bande. Si raccomanda la validazione nel lisato cellulare o tissutale specifico.
• Le applicazioni ELISA possono essere ottimizzate utilizzando l'anticorpo con PUS10 ricombinante o frammenti peptidici. La reattività crociata con topo e ratto suggerisce un'utilità negli studi comparativi; tuttavia, si consiglia di effettuare una titolazione sperimentale e di includere controlli.
• Poiché le funzioni di PUS10 differiscono tra nucleo e citoplasma, i saggi di frazionamento o l'immunofluorescenza possono essere utili per studiare la localizzazione subcellulare; si noti che questo anticorpo non è stato validato per IF o IHC e richiederebbe test indipendenti.

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