Anticorpo policlonale coniglio Anti-PXDN per WB e ELISA - Q92626

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Peroxidasin Homolog (PXDN)

• La peroxidasin omologa (PXDN) è una perossidasi secreta contenente eme, appartenente alla famiglia delle perossidasi, nota anche come antigene associato al melanoma MG50, perossidasi vascolare 1 e proteina del gene responsivo a p53 2.
• PXDN catalizza l'ossidazione a due elettroni del bromuro da parte del perossido di idrogeno per generare ipobromito, che media la formazione di legami crociati a solfilimmina tra residui di metionina e idrossilisina negli esameri NC1 del collagene di tipo IV, essenziali per l'assemblaggio della rete di collagene IV. Riferimenti correlati: PMID:18929642, PMID:19590037, PMID:22842973
• Questi legami crociati a solfilimmina sono fondamentali per l'assemblaggio dipendente dal collagene IV della fibronectina e della laminina, e per la completa segnalazione mediata dalla matrice extracellulare (ECM), inclusa la proliferazione cellulare indotta da fattori di crescita e la sopravvivenza delle cellule endoteliali, contribuendo quindi all'integrità della membrana basale. Riferimenti correlati: PMID:19590037, PMID:32543734, PMID:34679700
• PXDN può anche promuovere la tubulogenesi e l'angiogenesi attraverso le vie ERK1/2, Akt e FAK. Riferimenti correlati: PMID:25713063
• Inoltre, PXDN bromura la catena alfa2 del collagene IV in corrispondenza di Tyr-1485, determinando l'arricchimento di bromo nelle membrane basali. In vitro, può ossidare tiocianato e ioduro, che possono competere con il bromuro e inibire la formazione del legame solfilimmina. Riferimenti correlati: PMID:32571911, PMID:28154175
• PXDN è espresso in numerosi tessuti, con livelli più elevati nel cuore, polmone, ovaio, milza, intestino e placenta, e livelli più bassi in fegato, colon, pancreas, rene, timo, muscolo scheletrico e prostata. È espresso anche in vari tumori tra cui melanoma, carcinoma mammario, carcinoma ovarico e glioblastoma.
• Subcellularemente, PXDN si localizza nel reticolo endoplasmatico e viene secreta nello spazio extracellulare, incorporandosi nella matrice extracellulare e nella membrana basale.
• La proteina contiene ripetizioni ricche di leucina, domini immunoglobulina e un dominio perossidasico; lega eme, calcio e laminine. Varianti patologiche e splicing alternativo implicano PXDN in processi dello sviluppo e patologici. Riferimenti correlati: PMID:32485152

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1320–1479 vicino all'estremità C-terminale di PXDN umano; questa regione può consentire la rilevazione della forma full-length e di alcune forme processate. Si consiglia di validare la rilevazione dell'isoforma bersaglio nei sistemi di campioni pertinenti.
• Per il WB, il peso molecolare predetto è di circa 165 kDa; l'uso di un gel di acrilammide a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati può migliorare la risoluzione e l'efficienza di trasferimento per le proteine ad alto peso molecolare.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con PXDN di topo, potenzialmente consentendo studi su modelli murini. È comunque necessario confermare la reattività nella propria configurazione sperimentale.
• Per l'ELISA, titrare l'anticorpo contro l'immunogeno o la proteina nativa per stabilire le concentrazioni di lavoro ottimali; gli anticorpi policlonali possono richiedere un'ottimizzazione del blocco per ridurre al minimo il segnale di fondo.

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