Anticorpo policlonale di coniglio anti-PYM1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9BRP8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PYM1

• PYM1, noto anche come Partner of Y14 and mago, è un regolatore chiave del complesso di giunzione esonica (EJC) e agisce come fattore di disassemblaggio dell'EJC, promuovendo la rimozione dipendente dalla traduzione dell'EJC dagli mRNA sottoposti a splicing.
• Si associa alla subunità ribosomiale 40S, limitando probabilmente la sua attività di disassemblaggio dell'EJC agli mRNA sottoposti a traduzione attiva e prevenendo la disgregazione prematura del complesso.
• PYM1 interferisce con la degradazione dell'mRNA mediata da codoni di terminazione prematuri (NMD) e aumenta la traduzione degli mRNA sottoposti a splicing, antagonizzando così le funzioni dell'EJC dopo lo splicing.
• Sebbene PYM1 possa legare l'RNA, la rilevanza funzionale di questa interazione non è chiara; il legame all'RNA è stato osservato in alcuni studi (PubMed:14968132), ma in altri non è stato osservato indipendentemente dall'EJC (PubMed:19410547). Riferimenti correlati: PMID:14968132, PMID:19410547
• La proteina è localizzata sia nel citoplasma sia nel nucleo, in particolare all'interno del nucleolo e del nucleoplasma, in linea con il suo ruolo di navetta nel processamento dell'mRNA.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolarne l'attività o le interazioni.
• Lo splicing alternativo genera più isoforme, conferendo diversità funzionale al prodotto del gene PYM1.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-204) di PYM1 umano, suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere epitopi all'interno di questo dominio conservato; si consiglia di considerare l'allineamento delle sequenze con gli ortologhi di topo e ratto per supportare la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, PYM1 ha un peso molecolare previsto di circa 23 kDa; validare la dimensione della banda osservata nel sistema campione pertinente e utilizzare controlli di caricamento appropriati.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, è necessario ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione, poiché PYM1 presenta una localizzazione sia citoplasmatica sia nucleare; includere marcatori degli organelli per confermare la specificità.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per il rilevamento qualitativo o semi-quantitativo; se sono necessari dati quantitativi, considerare strategie con coppie di anticorpi per i test immunologici a sandwich.
• Poiché l'anticorpo è una miscela policlonale, è necessario verificare la coerenza tra i lotti durante il passaggio da un lotto di produzione all'altro e determinare empiricamente le diluizioni di lavoro per ciascun test.

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