mAb di coniglio Anti-Piruvato Carbossilasi (PC) per WB e ELISA - P11498

Specifiche e Parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Piruvato Carbossilasi

• La piruvato carbossilasi (PC) è un enzima mitocondriale che catalizza la carbossilazione del piruvato dipendente da ATP in ossalacetato, svolgendo un ruolo chiave nella gluconeogenesi e nella biosintesi lipidica.
• L'enzima svolge una reazione in due fasi: prima, la carbossilazione della biotina tramite idrolisi dell'ATP; secondo, il trasferimento del gruppo carbossilico al piruvato.
• Espressione tessuto-specifica: nel fegato e nel rene, la PC avvia la sintesi del glucosio; nel tessuto adiposo, nel fegato e nel cervello, contribuisce alla sintesi lipidica.
• Codificata dal gene PC, la proteina umana è una carbossilasi dipendente dalla biotina e fa parte della famiglia degli enzimi multifunzionali.
• Localizzata nella matrice mitocondriale, la PC contiene un peptide di transito per l'importazione mitocondriale.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, e la proteina è associata a varianti patologiche.
• Contiene siti di legame per ATP, biotina e manganese, essenziali per la sua attività catalitica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) della PC umana; questa regione è conservata nel topo e nel ratto, il che corrisponde alla reattività crociata osservata.
• Per Western blot, è prevista una banda intorno a 130 kDa; a causa dell'elevato peso molecolare, si consiglia l'uso di un gel riducente e controlli di caricamento appropriati.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato sia per formati diretti che di cattura-rilevamento; validare con PC ricombinante o lisati di tessuti in cui la PC è altamente espressa (ad esempio, campioni di fegato o rene).
• Poiché la PC è una proteina mitocondriale, la preparazione del campione può richiedere protocolli di arricchimento mitocondriale per una rilevazione ottimale.
• A causa della presenza di biotina nel bersaglio, evitare reagenti di bloccaggio contenenti biotina se si utilizzano sistemi di rilevazione basati su biotina per ridurre il segnale di fondo.

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