Anticorpo policlonale di coniglio anti-Piruvato carbossilasi (PC) per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P11498

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Piruvato carbossilasi (PC)

• La Piruvato carbossilasi (PC) è un enzima mitocondriale che catalizza la carbossilazione ATP-dipendente del piruvato in ossalacetato, una reazione anaplerotica critica per il reintegro degli intermedi del ciclo dell'acido tricarbossilico.
• La reazione avviene in due fasi: il gruppo prostetico biotinico viene prima carbossilato utilizzando bicarbonato e ATP, seguito dal trasferimento del gruppo carbossilico al piruvato per formare ossalacetato.
• La PC svolge un ruolo specifico per tessuto nella gluconeogenesi nel fegato e nel rene, e nella lipogenesi de novo nel tessuto adiposo, fegato e cervello, collegando il metabolismo dei carboidrati e dei lipidi.
• Localizzata nella matrice mitocondriale, la PC è sintetizzata come un precursore con un peptide segnale che la indirizza ai mitocondri.
• La PC è una ligasi multifunzionale biotina-dipendente che richiede manganese o magnesio come cofattore metallico ed è regolata da acetilazione e fosforilazione.
• Le mutazioni nel gene della PC sono associate alla carenza di piruvato carbossilasi, un raro disturbo metabolico autosomico recessivo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 879–1178 della PC umana, mirando alla regione C-terminale; considerare di valutare la reattività con la PC endogena nella specie e nel tessuto rilevanti.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda vicino a 130 kDa; includere marcatori di peso molecolare appropriati e convalidare con controlli positivi.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ogni applicazione (WB, IF/ICC, IP, ELISA) utilizzando una serie di titolazione e condizioni di bloccaggio appropriate.
• È stata riportata reattività crociata per la PC umana, di topo e di ratto; data la natura policlonale, la consistenza da lotto a lotto dovrebbe essere verificata nel saggio previsto.

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