Anticorpo Policlonale Anti-QPCT per WB, IF/ICC, ELISA - Q16769

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di QPCT

• Identità proteica: QPCT (glutaminil-peptide ciclotransferasi), nota anche come glutaminil ciclasi (QC, sQC) e glutamil ciclasi, è un enzima transferasi secreto codificato dal gene QPCT. Appartiene alla famiglia delle aciltransferasi e contiene un sito attivo legante lo zinco.
• Funzione enzimatica principale: Catalizza la formazione di residui piroglutammilici N-terminali a partire da precursori glutaminilici o glutamilici, una modifica critica per la bioattività e la stabilità di molti peptidi e proteine.
• Specificità del substrato: Mostra una preferenza contro i residui acidi e il triptofano immediatamente adiacenti alla glutammina N-terminale, ma mostra poca dipendenza dalla lunghezza della catena peptidica oltre il secondo residuo.
• Processamento dell'amiloide-beta: In vitro, converte i peptidi di amiloide-beta troncati N-terminalmente (es. [Glu-3]-amiloide-beta) in forme modificate con piroglutammato, che sono più inclini all'aggregazione e neurotossiche.
• Rilevanza nelle malattie: Implicata nella malattia di Alzheimer attraverso la generazione di peptidi di amiloide-beta piroglutammato trovati nelle placche senili; può partecipare anche ad altre patologie correlate all'amiloide.
• Localizzazione subcellulare: Secreto nello spazio extracellulare, coerente con il suo ruolo nel modificare substrati extracellulari come ormoni, chemochine e peptidi amiloidi.
• Caratteristiche strutturali: Contiene legami disolfuro, siti di glicosilazione N-linked e un peptide segnale; la proteina matura ha un peso molecolare previsto di circa 40.9 kDa (osservato intorno a 41 kDa).
• Splicing alternativo: Il gene QPCT subisce splicing alternativo, producendo più isoforme; l'immunogeno (a lunghezza intera, aa 1-361) riconosce tutte le isoforme note contenenti questa regione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla proteina QPCT umana a lunghezza intera (aa 1-361), che dovrebbe fornire un'ampia copertura epitopica e può riconoscere sia le forme precursore che mature. La natura policlonale può migliorare la sensibilità di rilevamento tra le varianti di splicing.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda specifica vicino a 41 kDa in condizioni riducenti. Poiché QPCT è secreta, potrebbe essere preferibile analizzare siero, plasma o surnatanti di coltura cellulare piuttosto che lisati cellulari totali, a seconda del contesto sperimentale.
• Per IF/ICC, i protocolli di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzati per visualizzare QPCT nei compartimenti della via secretoria; la colorazione extracellulare potrebbe richiedere condizioni non permeabilizzanti. Può essere valutata la co-localizzazione con marcatori del Golgi o delle vescicole.
• Per ELISA, considerare l'uso dell'anticorpo in un formato sandwich con un anticorpo di cattura distinto; questo anticorpo può fungere da reagente di rilevamento. QPCT è presente in forma solubile nei fluidi biologici, rendendola adatta per saggi quantitativi.
• La reattività crociata con QPCT di topo e ratto consente la valutazione in modelli roditori di neurodegenerazione. Tuttavia, l'identità della sequenza amminoacidica non è al 100%, quindi la sensibilità dovrebbe essere validata nella specie e nel sistema tissutale rilevanti.

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