Anticorpo policlonale anti-RAB11B per WB, IF/ICC, ELISA - Q15907

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RAB11B

• La proteina correlata a Ras Rab-11B (RAB11B), nota anche come proteina legante il GTP YPT3, è un membro della superfamiglia Ras delle piccole GTPasi. Cicla tra lo stato inattivo legato al GDP e quello attivo legato al GTP, funzionando da interruttore molecolare nel traffico intracellulare di membrana.
  Riferimenti correlati: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B è un regolatore chiave del riciclo endocitico, controlla il riciclo apicale di proteine transmembrana come CFTR, ENaC, canali del potassio e canali del calcio di tipo L dipendenti dalla tensione. Regola inoltre le vie secretorie costitutive e regolate, inclusa l'esocitosi delle granule di insulina.
  Riferimenti correlati: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• La proteina è essenziale per il trasporto e il rilascio dei melanosomi dai melanociti e modula il trasporto intracellulare della V-ATPasi in risposta all'acidosi extracellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B promuove la ciliogenesi formando un complesso di targeting ciliare con Rabin8/RAB3IP, ASAP1, RAB11FIP3 e ARF4, facilitando il traffico vescicolare preciliare verso il centrosoma madre. Al contrario, la fosforilazione di WDR44 mediata dalla segnalazione di LPAR1 rompe questo complesso, inibendo la crescita delle ciglia.
  Riferimenti correlati: PMID:25673879, PMID:31204173

• Inoltre, RAB11B interagisce con RABL3 per promuovere la formazione delle vescicole ciliare, evidenziando i suoi molteplici ruoli nell'assemblaggio della ciglia primaria.
  Riferimenti correlati: PMID:36052645

• Subcellolarmente, RAB11B è associato prevalentemente alle membrane degli endosomi di riciclo, ma si trova anche su vescicole citoplasmatiche, vescicole secretorie, membrane delle vescicole sinaptiche e membrane dei fagosomi, il che riflette le sue dinamiche funzioni di traffico.

• Modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, citrullinazione, metilazione e prenilazione, regolano la sua attività, localizzazione e interazioni proteiche. Lo splicing alternativo genera più isoforme e le mutazioni sono associate a disabilità intellettiva.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 100–200 di RAB11B umano, che si trova in una regione probabilmente conservata tra le specie, coerente con la reattività crociata riportata verso topo e ratto. Questo progetto basato su peptide può riconoscere sia le conformazioni proteiche denaturate che quelle native.
• Per il Western blotting è prevista una banda a circa 24 kDa. Dato che RAB11B subisce prenilazione e altre modifiche, in alcuni campioni possono essere osservati lievi spostamenti di dimensione o bande aggiuntive; validare utilizzando controlli positivi come lisati cellulari di HeLa o HEK293.
• In immunofluorescenza/immunocitochimica, la permeabilizzazione è generalmente richiesta per bersagli intracellulari. Ci si dovrebbe aspettare pattern di colorazione endosomiale e vescicolare, con possibile arricchimento negli endosomi di riciclo.
• Per applicazioni ELISA, l'immunogeno peptidico può essere utilizzato come antigene di rivestimento, ma si consiglia di ottimizzare attentamente la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di blocco.
• Come per ogni anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti va verificata utilizzando un controllo positivo standardizzato. Si consiglia di validare nel sistema di campione pertinente (uomo, topo o ratto) per confermare le prestazioni.

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