Anticorpo policlonale anti-RAB20 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9NX57

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di RAB20

• RAB20 è un membro della famiglia Rab delle piccole GTPasi, che sono regolatori chiave del traffico di membrana intracellulare, ciclando tra uno stato inattivo legato al GDP e uno attivo legato al GTP.
• È coinvolta nell'endocitosi apicale e nei percorsi di riciclo, contribuendo all'organizzazione dinamica dei compartimenti endomembranosi.
• RAB20 funziona specificamente nella maturazione e nell'acidificazione dei fagosomi durante l'ingestione di patogeni come Staphylococcus aureus e Mycobacterium tuberculosis.
• Svolge inoltre un ruolo critico nel mediare la fusione dei fagosomi con i lisosomi, un passaggio chiave nella clearance dei patogeni.
• A livello subcellulare, RAB20 si localizza nell'apparato di Golgi, nelle vescicole citoplasmatiche e nella membrana del fagosoma, coerentemente con i suoi ruoli nel traffico.
• L'espressione tissutale è generalmente bassa nel pancreas normale, ma è fortemente sovraregolata negli adenocarcinomi pancreatici esocrini (a livello proteico), suggerendo un ruolo nel cancro.
• Come proteina legante il GTP, RAB20 richiede magnesio per il legame nucleotidico ed è prenilata post-traduzionalmente per l'attacco alla membrana.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 80–190 della RAB20 umana, una regione centrale che probabilmente copre il dominio GTPasico; la reattività dell'anticorpo può essere influenzata dallo stato di attivazione o dallo stato di prenilazione del target.
• Per il Western blot, è prevista una banda vicino a 26 kDa; considerare l'utilizzo di condizioni di lisi appropriate e controlli positivi (ad esempio, linee cellulari di adenocarcinoma pancreatico) per confermare la specificità.
• In IF/ICC, convalidare la colorazione in cellule con nota espressione di RAB20 e tenere presente che la localizzazione può spostarsi tra Golgi, vescicole e fagosomi a seconda del contesto cellulare.
• È indicata la reattività crociata con il topo; quando si utilizza in modelli murini, verificare la reattività nel tessuto o nel tipo cellulare pertinente.
• Per l'ELISA, ottimizzare l'antigene di rivestimento e le condizioni di rilevamento; l'anticorpo può riconoscere sia la RAB20 ricombinante che quella nativa.

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